Question

【題目】發(fā)的小麥種子中α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶的含量顯著增高．α﹣淀粉酶不耐酸、較耐熱，在pH為3.6、0℃下可迅速失活，而β﹣淀粉酶耐酸、不耐熱，在70℃條件下15min后失活．根據(jù)它們的這種特性，可分別測定一種酶的催化效率．某實(shí)驗小組進(jìn)行了“提取小麥種子中α﹣淀粉酶并測定α﹣淀粉酶催化淀粉水解的最適溫度”的相關(guān)實(shí)驗． 實(shí)驗材料：萌發(fā)3天的小麥種子（芽長約1cm）．
主要試劑及儀器：1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)麥芽糖溶液、5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸餾水、石英砂、恒溫水浴鍋等．
實(shí)驗步驟：
步驟一：制備酶溶液．

步驟二：____________________________ ， 取出后冷卻．
步驟三：取6支干凈的、體積相同并具刻度的試管依次編號，按如表要求加入試劑，再觀察各試管內(nèi)的顏色變化．（注：+表示碘液變藍(lán)色，﹣表示碘液不變色）

試管編號	1	2	3	4	5	6
5%的可溶性淀粉溶液（mL）	8	8	8	8	8	8
恒溫水浴5min（℃）	0	20	40	60	80	100
α﹣淀粉酶保持活性而β﹣淀粉酶失去活性的溶液（mL）	1	1	1	1	1	1
恒溫水浴5min（℃）	0	20	40	60	80	100
溶液混合，振蕩后恒溫水浴5min（℃）	0	20	40	60	80	100
加入碘液，振蕩后觀察顏色變化	+++	++	+	﹣	++	+++

請回答下列問題：
（1）選用萌發(fā)的小麥種子提取酶液的主要理由是 ．
（2）步驟二的具體操作是 ．
（3）該實(shí)驗中能否選用斐林試劑檢測實(shí)驗結(jié)果？（能/不能）．理由是 ．
（4）若要進(jìn)一步研究小麥種子中β﹣淀粉酶的最適溫度，則需獲得β﹣淀粉酶保持活性而α﹣淀粉酶失活的酶溶液．請簡要寫出制備該種酶溶液的方法．

Answer 1

【答案】
（1）小麥種子萌發(fā)時形成大量的淀粉酶（α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶）
（2）將酶液置于70℃水浴中15 min下的環(huán)境中
（3）不能；利用斐林試劑檢測時需要水浴加熱，會改變該實(shí)驗中的溫度，影響實(shí)驗最終結(jié)果
（4）將步驟一中制取的酶液置于pH為3.6，溫度為0℃下的環(huán)境中（短暫時間，使α﹣淀粉酶失去活性）
【解析】解：（1）小麥種子中含淀粉豐富，萌發(fā)時形成大量淀粉酶；（2）該實(shí)驗測定α﹣淀粉酶催化淀粉水解的最適溫度，因此要使取得的酶液中的β﹣淀粉酶失去活性，而根據(jù)α﹣淀粉酶較耐熱，β﹣淀粉酶不耐熱的特性，在70℃條件下將獲得的酶液處理15 min，可使酶液中的β﹣淀粉酶失活；（3）由于利用斐林試劑檢測時需要水浴加熱，會改變了該實(shí)驗中的自變量（溫度），影響實(shí)驗最終結(jié)果，所以不能選用斐林試劑檢測實(shí)驗結(jié)果．（4）根據(jù)α﹣淀粉酶不耐酸，在pH為3.6、0℃下可迅速失活，而β﹣淀粉酶耐酸的特性，只需將步驟一中制取的酶液置于pH為3.6，溫度為0℃的環(huán)境中短暫時間，使α﹣淀粉酶失去活性，即可得到β﹣淀粉酶保持活性而α﹣淀粉酶失活的酶溶液． 所以答案是：（1）小麥種子萌發(fā)時形成大量的淀粉酶（α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶）（2）將酶液置于70℃水浴中15 min下的環(huán)境中（3）不能 利用斐林試劑檢測時需要水浴加熱，會改變該實(shí)驗中的溫度，影響實(shí)驗最終結(jié)果（4）將步驟一中制取的酶液置于pH為3.6、溫度為0℃下的環(huán)境中（短暫時間，使α﹣淀粉酶失去活性）
【考點(diǎn)精析】利用探究影響酶活性的因素對題目進(jìn)行判斷即可得到答案，需要熟知pH: 在最適pH下，酶的活性最高，pH值偏高或偏低酶的活性都會明顯降低；溫度: 在最適溫度下酶的活性最高，溫度偏高或偏低，酶的活性都會明顯降低；酶的濃度、底物濃度、產(chǎn)物濃度的影響．