Question

【題目】下圖為蘭州環保部門對流經我市黃河中段水域大腸桿菌進行檢測的操作和配方圖。據圖回答下列相關問題：

（1）圖甲中濾膜的孔徑應_____（填“大于”或“小于”）大腸桿菌，該計數方法的名稱是_________。

（2）配制圖乙中的基礎培養基時，除了水分、無機鹽和瓊脂以外，還應加入__________。待各成分都熔化后,調整pH和滅菌，待冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近___________。大腸桿菌在伊紅美藍培養基上生長呈黑色菌落，從功能上劃分，該培養基屬于_________培養基。

（3）用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌，操作時，接種環通過灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是_________。

（4）要檢測樣液中的大腸桿菌含量，取1ml河水樣本，加入9ml無菌水，充分混勻后，在5個平板上用涂布平板法分別接入0.1ml樣液，在37℃的培養箱中放置48小時，5個平板上的黑色菌落數分別為5、51、50、49、102。據此可得出1ml河水樣本中活菌數為____個。

Answer 1

【答案】 小于 濾膜法 氮源（蛋白胨） 倒平板 鑒別 將聚集的菌體逐步稀釋，以便獲得單個菌落 5×103（或5000）

【解析】試題分析：熟記并理解微生物的實驗室培養、微生物的分離與計數的相關基礎知識、形成清晰的知識網絡。在此基礎上從題圖中提取信息并結合題意作答。

(1)圖甲操作的目的是用濾膜過濾待測水樣，以獲得大腸桿菌，因此濾膜的孔徑應小于大腸桿菌，該計數方法的名稱是濾膜法。

(2)各種培養基的具體配方不同，但一般都含有水、無機鹽、碳源、氮源。圖乙中的乳糖可為微生物的生長提供碳源，據此可知：在配制圖乙中的基礎培養基時，除了水分、無機鹽和瓊脂以外，還應加入氮源。為了避免雜菌污染，倒平板時，應在酒精燈火焰附近進行操作。伊紅美藍培養基上生長的大腸桿菌菌落呈現黑色，從功能上劃分，該培養基屬于鑒別培養基。

(3) 用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌的操作時，在第二次及以后劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是：將聚集的菌體逐步稀釋，以便獲得單個菌落。

(4) 由題意可知：將10倍的稀釋液分別涂布到5個平板上培養，每個平板均接種了0.1mL樣液，在37℃的培養箱中放置48小時，5個平板上的黑色菌落數分別為5、51、50、49、102。統計菌落數目時，應將菌落數明顯最少和最大的舍棄，所以0.1mL稀釋液中平均有(51＋50＋49)÷3＝50個活菌，每毫升稀釋液中活菌的數目為50÷0.1＝500，則1ml河水樣本中活菌數為500×10＝5000＝5×103個。