Question

【題目】將PVY病毒外殼蛋白基因(PVY-CP)導入馬鈴薯，并使之表達即可獲得抗PVY病毒馬鈴薯。圖示是獲得抗病毒馬鈴薯的部分操作，PVY-CP可以從質粒A中獲取；質粒B是選用的運載體，另已知部分限制酶識別序列和切割位點：

請結合圖像，運用所學知識回答問題：

(1)含有PVY-CP的質粒A保存在某細菌群體中，各個細菌含有相關不同的基因，這樣的細菌群體稱為_____________。

(2)關于步驟②中Ⅺenow酶的猜測，合理的是_____________。

A．催化合成的片段起引物作用

B．可以將DNA片段的粘性末端變成平末端

C．能催化DNA鏈的合成

D．與DNA連接酶的功能相同

(3)步驟④中應該使用的限制酶是________。

(4)利用基因工程將目的基因導入植物細胞，目前采用最多的方法是 。該方法首先需要將質粒C導入________中，進而轉化馬鈴薯薯片，然后通過________技術獲得抗PVY病毒馬鈴薯苗。

Answer 1

【答案】（1）基因文庫 （部分基因組文庫、基因組文庫給分） （2）BC （3）BamHⅠ、SmaⅠ(僅答出一種酶給1分) （4）農桿菌轉化法 農桿菌 植物組織培養

【解析】（1）將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷，導入受體菌群體儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因，為基因文庫。（2）據圖分析，該過程表示PCR技術，該DNA片段是要獲得PVY-CP，A錯。Klenow酶將DNA的粘性末端變成平末端，需要合成新DNA片段與之配對，B、C正確。沒有起到連接DNA片段的作用，D錯。（3）據表格分析，質粒B用BamHⅠ和SmaⅠ切割后，剛好一端為平末端，與步驟③DNA的平末端互補。另一端粘性末端，與步驟③DNA的粘性末端互補，再用DNA連接酶連接為重組質粒。（4）利用農桿菌轉化法進行轉化，首先需要將質粒C導入農桿菌，進而轉化馬鈴薯，然后通過植物組織培養植物組織培養。