Question

【題目】雙特異性單克隆抗體是指可同時與癌細胞和藥物結合的特異性抗體。下圖是科研人員通過雜交一雜交瘤細胞技術（免疫的B細胞和雜交瘤細胞雜交技術）生產能同時識別癌胚抗原和長春堿（一種抗癌藥物）的雙特異性單克隆抗體的部分過程。分析回答：

（1）過程①的目的是___________，制備雙特異性單克隆抗體的過程中用到的技術有___________（至少答出兩條）。

（2）過程②誘導融合的方法是___________，過程②選用的骨髓瘤細胞___________（填“能”或“不能”）在HAT培養基上生長。

（3）經過程③篩選得到的細胞還需轉移至多孔培養板中進行過程④，原因是_____________________。

（4）請根據所學知識，用箭頭和文字在圖中方框內補全獲取單克隆雜交一雜交瘤細胞的生產過程。

（5）獲得的單克隆雜交一雜交瘤細胞在體外條件下培養或___________，均可提取出大量的雙特異性單克隆抗體。

Answer 1

【答案】 使小鼠產生能分泌識別癌胚抗原抗體的漿細胞（B淋巴細胞）動物細胞融合、動物細胞培養 聚乙二醇（PEG）誘導、電激等 不能 從小鼠體內提取的B淋巴細胞不止一種類型（篩選得到的雜交瘤細胞產生的抗體不是單克隆抗體） 將獲得的B淋巴細胞與單克隆雜交瘤細胞融合→在選擇培養基上篩選出雜交→雜交瘤細胞→克隆化培養、抗體檢測篩選出單克隆的雜交→雜交瘤細胞 注射到小鼠腹腔內增殖

【解析】試題分析：單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（1）過程①表示給小鼠注射抗原，目的是刺激小鼠產生能分泌識別癌胚抗原抗體的漿細胞（B淋巴細胞）；根據單克隆抗體制備流程可知，該過程涉及到的技術有動物細胞融合技術、動物細胞培養技術。

（2）過程②誘導細胞融合的方法有聚乙二醇、滅活病毒、電激等；HAT選擇培養基的作用是篩選出雜交瘤細胞，而骨髓瘤細胞不能生長。

（3）從小鼠體內提取的B淋巴細胞不止一種類型（篩選得到的雜交瘤細胞產生的抗體不是單克隆抗體），因此經過程③篩選得到的細胞還需轉移至多孔培養板中進行過程④。

（4）單克隆抗體制備過程為，將獲得的B淋巴細胞與單克隆雜交瘤細胞融合→在選擇培養基上篩選出雜交→雜交瘤細胞→克隆化培養、抗體檢測篩選出單克隆的雜交→雜交瘤細胞。

（5）獲得的單克隆雜交一雜交瘤細胞在體外條件下培養或注射到小鼠腹腔內增殖，均可提取出大量的雙特異性單克隆抗體。