Question

【題目】【生物——選修3：現代生物科技專題】

回答利用農桿菌轉化法培育轉基因植物的相關問題：

（1）培育轉基因植物過程的核心步驟是構建基因表達載體，其目的是使目的基因在受體細胞中_____，并且可以通過復制遺傳給下一代，同時，使目的基因表達和發揮作用。

（2）構建基因表達載體時，可利用_____酶連接被限制酶切開的______鍵。

（3）組成基因表達載體的單體是_____。基因表達載體中的啟動子是_____識別和結合的部位，這種結合完成后才能驅動目的基因通過_____（填過程）合成mRNA。目的基因表達的翻譯過程的終止信號是______。

（4）用兩種限制酶Xba I和Sac I（兩種酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，獲得含目的基因的片段。若利用該片段構建基因表達載體，應選用下圖中的何種Ti質粒？___________。

Answer 1

【答案】 穩定存在 DNA連接 磷酸二酯 脫氧核苷酸 RNA聚合酶 轉錄 終止密碼子 甲

【解析】試題分析：農桿菌轉化法的具體過程：利用土壤的Ti質粒構建基因表達載體，即將目的基因整合到土壤農桿菌的Ti質粒上；將整合了目的基因的Ti質粒導入土壤農桿菌細胞內；利用土壤農桿菌感染植物細胞，該過程實際上是將含有目的基因的土壤農桿菌Ti質粒導入植物細胞內；含有目的基因的土壤農桿菌Ti質粒進入植物細胞后，可以把自己的一段基因整合到細胞核中的染色體上，這段基因中包含了目的基因。

（1）構建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩定存在，并且可以通過復制遺傳給下一代，同時，使目的基因表達和發揮作用。

（2）DNA連接酶的作用是在DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。

（3）基因表達載體的本質是DNA，其基本組成單位是脫氧核苷酸；基因表達載體中的啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，這種結合完成后才能驅動目的基因通過轉錄合成mRNA。目的基因表達的翻譯過程的終止信號是終止密碼子。

（4）用兩種限制酶XbaI和SacI（兩種酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，獲得含目的基因的片段，甲中Ti質粒中含有限制酶XbaI和SacI的切割位點，且用這兩種酶切割可將目的基因插入T-DNA中，甲正確；乙中Ti質粒中不含限制酶SacI的切割位點，乙錯誤；丙中Ti質粒中含有限制酶XbaI和SacI的切割位點，但用這兩種酶切割不會將目的基因插入T-DNA中，丙錯誤；丁中該Ti質粒中不含限制酶XbaI的切割位點，丁錯誤。