Question

【題目】內(nèi)皮素（ET）是一種含21個(gè)氨基酸的多肽，與高血壓、糖尿病、癌癥等有著密切聯(lián)系。研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮素功能異常與內(nèi)皮素主要受體ETA有關(guān)，科研人員通過構(gòu)建表達(dá)載體，實(shí)現(xiàn)了ETA基因在細(xì)胞中高效表達(dá)。其過程如下（圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的識別序列為CCC＇GGG，限制酶XhoI的識別序列為C＇TCGAG）。據(jù)圖回答下列問題：

（1）圖中ETA基因能夠在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的原因是 。

（2）過程①中需要用 酶處理,過程③中，限制酶Xho I切割DNA形成的黏性末端是 。用兩種限制酶切割，獲得不同的黏性末端，其主要目的是 。

（3）圖中的基因表達(dá)載體至少還缺少 ，鑒定ETA基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞需要用放射性同位素或熒光分子標(biāo)記的 作探針。

（4）已知熒光顯微鏡可以通過檢測熒光的強(qiáng)度來判斷SNAP基因是否表達(dá)及表達(dá)量。因此，利用SNAP基因與ETA基因結(jié)合構(gòu)成融合基因，目的是 ．

（5）人皮膚黑色素細(xì)胞上有內(nèi)皮素的特異受體，內(nèi)皮素與黑色素細(xì)胞膜上的受體結(jié)合后，會刺激黒色素細(xì)胞的增殖、分化并激活酪氨酸酶的活性，從而使黑色素增加。美容時(shí)可以利用注射ETA達(dá)到美白祛斑效果，原因是 ，從而抑制了黑色素細(xì)胞的增殖和黑色素的形成。

Answer 1

【答案】（1）所有生物共用一套遺傳密碼

（2）逆轉(zhuǎn)錄 —AGCT（或—GAGCT—C）

使目的基因定向連接到載體上（避免目的基因及載體的任意連接）

（3）終止子 ETA基因

（4）檢測ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量

（5）ETA能與內(nèi)皮素結(jié)合（減少了內(nèi)皮素與黑色素細(xì)胞膜上內(nèi)皮素受體的結(jié)合）

【解析】

試題分析：（1）目的基因能夠在受體細(xì)胞表達(dá)的原因是不同的生物共用一套遺傳密碼。

（2）據(jù)圖分析，過程①是RNA形成DNA的逆轉(zhuǎn)錄過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。過程③中限制酶XhoI切割DNA形成的黏性末端是—AGCT。用兩種限制酶切割，獲得不同的黏性末端，可以避免目的基因及載體的任意連接，使目的基因定向連接到載體上。

（3）圖中基因表達(dá)載體含有啟動(dòng)子、標(biāo)記基因和目的基因，沒有終止子。鑒定ETA基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞需要用放射性同位素或熒光分子標(biāo)記的ETA基因作探針。

（4）檢測SNAP基因是否表達(dá)及表達(dá)量時(shí)，利用SNAP基因與ETA基因結(jié)合構(gòu)成融合基因。

（5）ETA能與內(nèi)皮素結(jié)合，減少了內(nèi)皮素與黑色素細(xì)胞膜上內(nèi)皮素受體的結(jié)合，可以抑制了黑色素細(xì)胞的增殖和黑色素的形成。