Question

【題目】下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線。圖中tetR表示四環素抗性基因，AmpR表示氨芐青霉素抗性基因，BAmHI、HinDIII、SmA I直線所示為三種限制酶的酶切位點。據圖回答：

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用__________限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含____________的培養基上進行。能驅動人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控因子是圖中的____________。過程①采用的操作方法通常是_____________。

（2）過程②代表的生物技術是_____________。對早期胚胎進行切割，經過程②可獲得多個新個體。目前最常見的是經分割產生的同卵______胎。

（3）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用____________技術。

（4）對代孕牛的要求是_________________。

Answer 1

【答案】（1）HinDⅢ和BAmHⅠ 氨芐青霉素 啟動子 顯微注射

（2）胚胎移植 雙

（3）抗原—抗體雜交

（4）有健康體質和正常繁殖能力

【解析】（1）限制酶能同時切割目的基因和運載體，由圖分析可知應用HinDⅢ和BAmHⅠ進行切割。由題意可知含有抗氨芐青霉素抗性，所以應先在含氨芐青霉素的培養基上進行初步選擇。驅動基因進行表達的是啟動子，它是RNA聚合酶識別和結合的位點，驅動基因的表達。要將重組載體導入到動物細胞中應用顯微注射法。

（2）過程②是將早期胚胎移入到代孕母牛體內的胚胎移植技術。胚胎分割中目前最常見的是分割產生的同卵雙胞胎。

（3）要檢測目的基因是否表達成功，應用抗原-抗體雜交。

（4）對代孕母畜應要求具有有健康體質和正常繁殖能力。