Question

【題目】甲、乙兩位同學從實際出發著手準備如下實驗。甲同學想從土壤中分離出自生固氮菌（一類能獨立固定氮氣的細菌）。查閱資料得知, 細菌的直徑大小通常在0.5~5μm之間，某針筒式微孔過濾器（濾膜孔徑0.22微米，如圖），耐熱性穩定。乙同學想充分利用當地的特有資源——檸檬來提取檸檬精油，查閱資料得知檸檬精油是揮發性物質。回答下列問題：

（1）從甲同學查閱的資料進行思考，如何配制含有不耐高溫藥品A的無菌培養液？________________（在無菌環境中操作）。

（2）甲同學進行富集培養時，為達到篩選自生固氮菌的目的，在配制培養液時不應添加_________營養物質。培養時要將裝有培養液的錐形瓶放置在搖床上，其目的是提高培養液中的_____________，同時使菌體與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率。進行分離、純化培養時，要先將培養基倒入培養皿中，制成平板。如何判斷所制作的平板沒有被微生物污染？_____________。

（3）乙同學想通過水中蒸餾法提取檸檬精油，可以嗎？___________________。請你說出理由：________________________。

Answer 1

【答案】 將溶解好的A溶液通過滅菌的針筒式微孔過濾器濾去微生物后，取適量加入到滅菌的培養液中，搖勻即可 含氮物質（氮源） 溶解氧 待平板冷凝后，置于恒溫箱中1﹣2天，沒有長出微生物的是符合無菌要求的平板 不可以 水中蒸餾會導致原料焦糊和有效成分水解等問題

【解析】試題分析：據圖分析，某針筒式微孔過濾器的濾膜孔徑為0.22微米，而題干信息顯示細菌的直徑大小通常在0.5~5μm之間，因此通過該針筒式微孔過濾器后可以除去細菌，獲得無菌培養液。

（1）根據以上分析可知，為了獲得含藥品A的無菌培養液，應該通過圖示針筒式微孔過濾器，即將溶解好的A溶液通過滅菌的針筒式微孔過濾器濾去微生物后，取適量加入到滅菌的培養液中，搖勻即可。

（2）自生固氮菌具有固氮能力，其培養基中不需要加入氮源，而其他微生物沒有固氮能力，因此用不含氮元素的培養基可以篩選出自生固氮菌。將裝有培養液的錐形瓶放置在搖床上，可以增加培養液中的溶解氧的含量，促進菌種的有氧呼吸，同時還能夠使菌體與培養液充分接觸，以提高營養物質的利用率。若要判斷制作的平板是否被微生物污染，應該不接種菌種，觀察平板上的微生物菌落情況，即待平板冷凝后，置于恒溫箱中1﹣2天，沒有長出微生物的是符合無菌要求的平板。

（3）水中蒸餾會導致原料焦糊和有效成分水解等問題，因此不能通過水中蒸餾法提取檸檬精油。