Question

【題目】科研人員為了分離、篩選藍莓果酒專用酵母來改善藍莓果酒的品質，進行了如下實驗：

① 取不同品種成熟藍莓制果漿，置于恒溫培養箱中自然發酵至產生大量氣泡和明顯酒味；

② 將藍莓發酵液梯度稀釋后，進行涂布平板操作，每個濃度梯度3個平板，并在恒溫下培養2d，根據酵母菌菌落特征挑取單菌落；

③ 將挑取的單菌落擴大培養后，通過平板劃線法分離純化并保存；

④ 檢測篩選菌株的發酵性能，得到如下實驗結果。

品種	乙醇體積分數/%					pH
	8%	10%	12%	14%	15%	4.00	2.98	2.03	1.48
葡萄釀酒酵母	++++	++++	+	-	-	++++	++++	-	-
BL-21	++++	+++	+	-	-	++++	++++	-	-
BF-09	++++	++++	++	-	-	++++	++++	+	-
BF-17	++++	++++	++	+	-	++++	++++	++	-

注：“-”表示不產氣；“+”表示產氣，“+”越多產氣越多。

請分析回答：

（1）步驟①恒溫培養箱的溫度控制在20℃左右，其主要目的是________________________。

（2）步驟②中，發酵液應使用無菌水進行梯度稀釋。稀釋涂布平板法依據的原理是____________。

（3）配制培養某的主要步驟是：計算→稱量→溶化→ ______→倒平板。在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是________________________。

（4）步驟③平板劃線時，常用的工具是接種環，對接種環的處理要求是__________________。

（5）固體培養基常用瓊脂作凝固劑，理想的凝固劑應具有的特點是____________（多選）。

A．含有某些特殊的營養物質 B．消毒滅菌不會改變其特性

C．能被微生物分解和利用 D．微生物生長溫度范圍內保持固體狀態

E．配制方便且有良好的透明性

（6）根據實驗結果推知，____________（品種）是較理想的釀酒菌種。

Answer 1

【答案】使酵母菌細胞快速生長、繁殖 在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個菌落 滅菌 檢測培養基平板滅菌是否合格 每次劃線前后都要用灼燒法對接種環進行灼燒滅菌 BDE BF-17

【解析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養兼性厭氧型．果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，反應式如下：；（2）在無氧條件下，反應式如下：。2、稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基表面進行培養；在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個菌落．

（1）酵母菌生長的適宜溫度是18-25℃，所以步驟①恒溫培養箱的溫度控制在22℃左右的目的是為酵母菌細胞生長、繁殖提供適宜的溫度．

（2）步驟②中，發酵液應使用無菌水進行梯度稀釋．稀釋涂布平板法依據的原理是在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的菌種分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個菌落．

（3）配制培養某的主要步驟是：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是檢測培養基平板滅菌是否合格．

（4）步驟③平板劃線時，常用的工具是接種環，對接種環的處理要求是每次劃線前后都要用灼燒法對接種環進行灼燒滅菌．

（5）固體培養基常用瓊脂作凝固劑，理想的凝固劑應具有的特點是消毒滅菌不會改變其特性、微生物生長溫度范圍內保持固體狀態、配制方便且有良好的透明性．故選：BDE．

（6）分析表格中的發酵性能可知，BF-17對乙醇和酸的耐受性最強，是較理想的釀酒菌種．