Question

【題目】（題文）農桿菌是一種在土壤中生活的微生物，能在自然條件下感染植物，因而在植物基因工程中得到了廣泛的運用。下面是農桿菌轉化法的示意圖，試回答下列問題：

（1）獲取目的基因的方法一般有_____、______等（寫出兩種）。理論上，基因組文庫含有一種生物的____基因；而cDNA文庫中含有生物的_____基因。

（2）圖中c過程中，農桿菌能感染_______、______植物，原理是：在農桿菌的Ti質粒上存在______片段，它具有可以整合到受體細胞______的特點，從而通過農桿菌的轉化作用，使目的基因進入植物細胞并穩定維持和表達。

（3）植物基因工程中將目的基因導入受體細胞的方法除了農桿菌轉化法之外，還可采取的方法是________、_______。(至少寫出兩種)

Answer 1

【答案】 從基因文庫中獲取目的基因 利用PCR技術擴增目的基因或通過DNA合成儀用化學方法直接人工合成等 全部 部分 雙子葉植物 裸子植物 T—DNA片段 染色體DNA 基因槍法 花粉管通道法

【解析】農桿菌轉化法的原理：農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。根據農桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上。據圖分析，a表示構建基因表達載體的過程，b表示將重組質粒導入農桿菌的過程，c表示將含有重組質粒（目的基因）的農桿菌導入植物細胞的過程，d表示植物組織培養的過程。

（1）基因工程的第一個步驟是獲取目的基因，常用的方法有從基因文庫中獲取目的基因、利用PCR技術擴增目的基因、通過DNA合成儀用化學方法直接人工合成等；基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫，其中基因組文庫含有該種生物的全部基因，而cDNA文庫只含有該種生物的部分基因。

（2）在自然條件下，農桿菌可以感染雙子葉植物和裸子植物，而對大多數單子葉植物沒有感染能力；農桿菌轉化法的具體原理是在農桿菌的Ti質粒上存在T-DNA片段，它具有可轉移至受體細胞并整合到受體細胞染色體的DNA上的特點，因此只要將攜帶外源基因的DNA片段插入到T-DNA片段即可實現將目的基因導入到植物細胞染色體的DNA。

（3）將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法。