Question

【題目】回答下列（一）（二）（三）小題

（一）在植物組織培養過程中，激素的添加已成為一種常規的實驗手段。在植物組織培養過程中，已研究過的植物激素有生長素、細胞分裂素、赤霉素等。

（1）植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和_______的關鍵性激素。

（2）若該實驗材料為菊花，則應對其進行_______（填“消毒”或“滅菌”），然后切取一些小組織塊，放在固體培養基中培養，脫分化在___________ 表面形成一種相對沒有分化的活的_____________細胞團，即愈傷組織。

（3）將含有愈傷組織培養物的試管放在搖床上，通過__________培養可以分散得到單細胞，單細胞再發育成胚狀體，最后得到新植株。

（二）果酒的制作離不開酵母菌，泡菜的制作離不開乳酸菌，請回答下面的問題。

（1）為了獲得耐高糖、耐酸特性的酵母菌菌種，可以對野生菌種進行 _______________，然后在___培養上進行篩選得到。

（2）篩選乳酸菌時培養基應放在 ___________環境條件下，培養基中的尿素可為乳酸菌生長提供 _________。

（三）下列是有關固定化酶及細菌培養與分離的問題，請回答下面的問題。

（1）固定化酶是將水溶性酶用物理或化學方法固定在某種介質上，使之成為 _________而又有酶活性的制劑。可用_________法將α-淀粉酶固定在石英砂上形成固定化酶柱。

（2）采用平板劃線法接種時，開始接種時要灼燒接種環，目的是_________。要把接種后的培養基和一個未接種的培養基同時放入恒溫箱培養，設置“未接種的培養基”作對照的目的是_____________________。

（3）某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養基、滅菌、接種及培養、菌落觀察與計數。下列與此實驗相關問題的敘述中，正確的是________

A.實驗用過的帶菌培養基須經過加熱后才能倒掉

B.利用平板劃線法對細菌進行分離純化并計數

C.觀察細菌培養的實驗時，最好同時在另一平板上接種澄清湖水作為對照實驗

D.培養基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養提供了氮源和碳源

Answer 1

【答案】再分化消毒創傷（傷口）薄壁液體懸浮誘變處理（或紫外線照射、射線照射）高糖和低pH無氧或缺氧氮源不溶于水吸附滅菌 檢驗培養基（過程）是否被污染D

【解析】

本題考查植物的組織培養技術、果酒和泡菜的制作、酶的固定以及微生物的培養和分離，可結合課本的知識進行分析解答本題。

（一）（1）植物組織培養過程：離體的植物器官、組織或細胞愈傷組織形成根、芽植物體。植物組織培養過程植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。培養基中加入生長素和細胞分裂素的摩爾濃度比決定組織是生根，還是生芽。

（2）為了防止雜菌污染，應對外植體（菊花莖段）消毒。將小組織塊放在固體培養基中進行培養，植物激素的刺激下發生脫分化，在創口表面形成一種由相對未分化的薄壁細胞團組成的愈傷組織。

（3）將含有愈傷組織培養物的試管放在搖床上，通過液體懸浮培養可以分散得到單細胞，單細胞再發育成胚狀體，最后得到新植株。

（二）（1）為了獲得耐高糖、耐酸特性的酵母菌菌種，可以采用誘變育種的方法，即對野生菌種進行誘變處理，然后在固體培養基上培養。誘變處理后，酵母菌有耐高糖、耐酸特性的酵母菌和野生菌種，可用添加有高濃度糖（蔗糖或葡萄糖），pH為酸性的培養基進行培養篩選。

（2）乳酸菌是一種厭氧型細菌，可將培養基放在無氧的環境條件下對乳酸菌進行篩選。尿素中含有氮元素，能夠為微生物提供氮源。

（三）（1）固定化酶是將水溶性酶用物理或化學方法固定在某種介質上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。固定化的方法有吸附法、共價偶聯法、交聯法和包埋法等，如可用吸附法將α-淀粉酶固定在石英砂上形成固定化酶柱。

（2）采用平板劃線法接種時，開始接種時要灼燒接種環，目的是為了避免接種環上的微生物污染培養基；平板劃線除首次劃線外，每次劃線前都要灼燒接種環，目的是為了殺死上次劃線結束殘留在接種環上的菌種；平板劃線結束時要灼燒接種環，其目的是避免接種環上殘留的菌種污染環境和感染操作者。要把接種后的培養基和一個未接種的培養基同時放入恒溫箱培養，設置“未接種的培養基”作空白對照，是為了判斷培養基是否被污染。

（3）帶菌的培養基要高壓蒸汽滅菌后才能倒掉，以免污染環境，A錯誤；利用平板劃線法可以分離純化細菌，無法進行計數，B錯誤；澄清湖水中含有微生物。因此，要使該實驗所得結果可靠，應同時在另一平板上接種無菌水作為對照進行實驗，C錯誤；培養基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養提供了氮源和碳源，D正確。故選D。