Question

【題目】研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達的H蛋白在多種惡性 腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達。抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達H蛋白的乳腺癌細胞的生長，目前已成為有效的生物治療手段。

(1)選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點，是因為H蛋白在成年個體的正常組織中________(填“低表達”或“高表達”)。H蛋白是一個跨膜蛋白，結(jié)構(gòu)如圖所示。制備免疫小鼠用的H蛋白(抗原)時，應(yīng)構(gòu)建________區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細胞表達并提純。

(2)將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，取該小鼠的脾臟細胞與________細胞進行融合，使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是________，細胞融合的原理是________。

(3)將融合細胞在________培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細胞生長。將雜交瘤細胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，應(yīng)用抗原抗體雜交技術(shù)進行_________檢測。經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞。

(4)治療乳腺癌時，可單獨使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，殺死癌細胞。這充分體現(xiàn)了單克隆抗體________________的特點。

Answer 1

【答案】 低表達 胞外 骨髓瘤 PEG(或“聚乙二醇”) 細胞膜的流動性 選擇 抗體陽性 特異性強(或“識別抗原部位專一”)

【解析】試題分析：本題考查單克隆抗體技術(shù)，考查對單克隆抗體制備流程的理解和識記。解答此題，應(yīng)明確單克隆抗體的制備原理和單克隆抗體的優(yōu)點。

(1) H蛋白在多種惡性腫瘤中過量表達，在成年個體的正常組織中低表達，因此看選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點。H蛋白的胞外部分可被免疫系統(tǒng)識別，制備免疫小鼠用的H蛋白(抗原)時，應(yīng)構(gòu)建胞外區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細胞表達并提純。

(2)將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，取該小鼠的脾臟細胞與骨髓瘤細胞進行融合，使用PEG(或“聚乙二醇”)進行化學(xué)誘導(dǎo)融合，細胞融合依賴于細胞膜的流動性。

(3)將融合細胞在選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，可篩選出雜交瘤細胞。將雜交瘤細胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，應(yīng)用抗原抗體雜交技術(shù)進行抗體陽性檢測。經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞。

(4)治療乳腺癌時，使用抗H蛋白單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，定向殺死癌細胞，這充分體現(xiàn)了單克隆抗體特異性強(或“識別抗原部位專一”)的特點。