Question

【題目】科學家從鏈霉素提取抗除草劑基因（bar基因），培育抗除草劑作物，回答下列問題：
（1）如圖是重組質粒示意圖，據圖分析，需用酶處理鏈霉菌的DNA，以提取目的基因．為了篩選出成功導入dar基因的受體細胞，需在受體細胞培養基中添加 ．
（2）將種子的胚劃傷，簡稱劃胚，請說出農桿菌把將bar基因導入劃胚細胞的過程．
（3）某興趣小組要探究各種劃胚方式（包括橫劃、縱劃和穿刺），對bar基因導入大豆種子胚細胞效率的影響，請將有關實驗步驟補充完整． 步驟1：中培養2﹣3天；
步驟2：用技術鑒定萌發植株的細胞是否導入bar基因．
（4）下表是不同植物對除草劑耐受性研究的實驗結果．據表分析可知，玉米對除草劑耐受性最大，判定依據是 ． 不同濃度的除草劑處理后植物苗存活率

植物	除草劑濃度
	0%	0.025%	0.05%	0.1%	0.2%
玉米	100%	100%	94.1%	88.2%	58.8%
大豆	94.1%	88.2%	82.4%	82.4%	0%
高粱	94.1%	88.2%	82.4%	52.9%	0%

Answer 1

【答案】
（1）BamHⅠ和BgIⅡ；潮霉素
（2）傷口處的胚細胞分泌酚類化合物，吸引農桿菌移向這些細胞，使bar基因隨Ti質粒上的T﹣DNA轉移至受體細胞
（3）將數量相等的各種劃胚方式的種子，浸泡在帶bar基因的農桿菌菌液；DNA分子雜交
（4）隨著除草劑濃度的增加，玉米成活苗數下降幅度最小，且高于大豆和高粱（或“與大豆和高梁相比，在不同除草劑濃度下，玉米苗的存活率最高”）
【解析】解答】解：（1）據圖分析，提取抗除草劑基因（bar基因），需用BamHⅠ和BgIⅡ酶處理鏈霉菌的DNA．潮霉素抗性基因用于篩選和鑒別含有目的基因的受體細胞，因此要篩選出成功導入dar基因的受體細胞，需在受體細胞培養基中添加潮霉素．（2）借助農桿菌把將bar基因導入劃胚細胞的過程為：傷口處的胚細胞分泌酚類化合物，吸引農桿菌移向這些細胞，使bar基因隨Ti質粒上的T﹣DNA轉移至受體細胞．（3）探究各種劃胚方式對bar基因導入大豆種子胚細胞效率的影響，實驗步驟為：步驟1：將數量相等的各種劃胚方式的種子（包括橫劃、縱劃和穿刺），浸泡在帶bar基因的農桿菌菌液中培養2﹣3天； 步驟2：用DNA分子雜交技術鑒定萌發植株的細胞是否導入bar基因． （4）據表分析可知，隨著除草劑濃度的增加，玉米成活苗數下降幅度最小，且高于大豆和高粱，因此玉米對除草劑耐受性最大． 所以答案是：（1）BamHⅠ和BgIⅡ 潮霉素（2）傷口處的胚細胞分泌酚類化合物，吸引農桿菌移向這些細胞，使bar基因隨Ti質粒上的T﹣DNA轉移至受體細胞（3）將數量相等的各種劃胚方式的種子，浸泡在帶bar基因的農桿菌菌液 DNA分子雜交（4）隨著除草劑濃度的增加，玉米成活苗數下降幅度最小，且高于大豆和高粱（或“與大豆和高梁相比，在不同除草劑濃度下，玉米苗的存活率最高”）
1、基因工程的基本工具：“分子手術刀”﹣﹣限制性核酸內切酶（限制酶）、“分子縫合針”﹣﹣DNA連接酶、“分子運輸車”﹣﹣載體．2、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達載體的構建，③將目的基因導入受體細胞，④目的基因的檢測與鑒定．
【考點精析】掌握基因工程的原理及技術是解答本題的根本，需要知道基因工程的原理是利用DNA重組技術．