Question

【題目】轉基因抗蟲棉是人們應用較早的基因工程推廣項目，目前轉基因技術有了新的改進，如圖所示，請根據所學知識回答：

（1）構建相關的目的基因表達載體時，應該選擇的限制酶是 ；如圖，切割目的基因兩側序列和載體時用兩種限制酶，相較使用同種限制酶而言，其優點是，在目的基因兩側和載體切口處可能形成不同的 ，不但可以防止切割下的基因和切開的載體分別發生 ，還可以避免前者在插入載體切口處時產生與表達載體轉錄方向 （填“相同”或“相反”）的連接。

（2）若目的基因最終整合到染色休上，則從棉株1、2、3中各隨機取出一個葉肉細胞，其細胞核中含有的目的基因個數分別為 個。

（3）④過程通常采用 處理使染色體數恢復。取棉株2的兩個體細胞融合也能得到符合生產要求的棉株3，其原理為 和 。

Answer 1

【答案】

（1）EcoRl、BamH I 黏性末端 自身環化 相反

（2）0、1、2

（3）適宜濃度的秋水仙素溶液 細胞膜的流動性 植物細胞具有全能性

【解析】

（1）含有目的基因的外源DNA中有限制酶EcoRI、SamⅠ和BamHI的切割位點，但限制酶SamⅠ的切割位點位于目的基因上，不能用該酶進行切割，因此切割獲取目的基因時應選擇限制酶EcoRI和BamHI。用兩種限制酶切割目的基因和運載體可以分別形成兩種黏性末端，這樣不僅可以防止自身環化，還可以避免前者在插入載體切口處時產生與表達載體轉錄方向相反的連接。

（2）棉株l還未導入目的基因，因此其細胞核中不含目的基因；植株2是導入目的基因的單倍體植株，因此其細胞核中只含有1個目的基因； 植株3是植株2經過人工誘導染色體數目加倍后得到的，其細胞核中含有2個目的基因。

（3）④是人工誘導染色體數目加倍，④過程通常采用適宜濃度的秋水仙素溶液處理使染色體數恢復。取棉株2的兩個體細胞融合，其原理為細胞膜的流動性；由融合細胞發育到符合生產要求的棉株3，其原理為植物細胞具有全能。