Question

【題目】人血清蛋白（HSA)具有重要的醫用價值。下圖是以基因工程技術獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。

(1)如果HSA基因序列未知，可以采用____________的方法獲取該目的基因，為了使目的基因能夠在宿主細胞中復制和穩定保存，通常要先構建_____________后才能導入宿主細胞。

(2)方框中的“？”一般選用的生物是________,為了提高II過程的導入成功率，通常用________處理大腸桿菌。

(3)人體合成的初始HSA多肽，需要經過膜系統加工形成正確的空間結構才能有活性，所以，選擇_____途徑（填I或II)獲取rHSA更有優勢。

(4)為了鑒定宿主細胞中是否產生rHSA,可以用_____________方法來進行檢驗。

A.檢驗HSA基因是否導入

B.檢驗細胞中是否產生相應的mRNA

C.抗原、抗體雜交

D.檢測是否有標記基因

Answer 1

【答案】 從基因文庫中提取 重組DNA 農桿菌 氯化鈣 I C

【解析】試題分析：據圖分析，I過程將目的基因導入的是植物細胞，一般采用農桿菌轉化法，示意圖中？表示的是農桿菌；II過程的受體細胞是大腸桿菌，而大腸桿菌是原核生物，細胞中沒有內質網和高爾基體，所以該過程產生的蛋白質一般沒有生物活性。

（1）如果HSA基因序列未知，則不能人工方法合成或通過PCR技術擴增，則只能采用從基因文庫中提取的方法獲取該目的基因；為了使目的基因能夠在宿主細胞中復制和穩定保存，通常要先構建基因表達載體（重組DNA）后才能導入宿主細胞。

（2）將目的基因導入植物細胞常用農桿菌轉化法，因此方框中的“？”一般選用的生物是農桿菌；將目的基因導入微生物細胞時常有感受態細胞法，即用氯化鈣處理微生物細胞，使之成為易于吸收周圍環境中DNA分子的感受態。

（3）由于大腸桿菌是原核生物，其細胞中不含內質網和高爾基體，而人體合成的初始HSA多肽，需要經過膜系統加工形成正確的空間結構才能有活性，所以選擇I途徑獲取rHSA更有優勢。

（4）檢測目的基因是否表達形成蛋白質可以采用抗原-抗體雜交法。