Question

【題目】我國曾經發生過因“非典型性肺炎”而死亡的病例，經研究發現，該病是由SARS病毒(一種RNA病毒)感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作，其簡要的操作流程如圖：

⑴實驗步驟①所代表的反應過程是______________________。

⑵步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用限制性核酸內切酶和DNA連接酶，DNA連接酶的作用是將用限制性核酸內切酶切割的________________和________________連接起來。

⑶如果省略步驟②而將大量擴增的S蛋白基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S蛋白基因在大腸桿菌中不能________________，也不能________________。

⑷為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性，可用_______________與________________進行抗原—抗體特異性反應實驗，從而得出結論。

⑸步驟④和⑥的結果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是______________________。

Answer 1

【答案】 反轉錄 載體 S蛋白基因 復制　 合成S蛋白基因的mRNA 大腸桿菌中表達的S蛋白 SARS康復病人血清 相同 表達蛋白質所用的基因相同

【解析】試題分析：該題考查基因工程的應用方面的知識，由圖可知①為通過逆轉錄合成目的基因，②為構建重組質粒，③④為將目的基因導入到受體細胞，⑤⑥目的基因的表達。

（1）實驗步驟①由RNA為模板，合成 DNA的構成，該過程是逆轉錄。

（2）步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B，必須使用同種限制性核酸內切酶切割目的基因和載體，形成相同的粘性末端，再用DNA連接酶，形成重組DNA。

（3）如果省略步驟②基因表達載體的構建，而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能獨立進行復制，也不能進行以其為模板合成S基因的mRNA(或轉錄)過程。

（4）步驟④檢測所表達的S蛋白的特征，可用大腸桿菌中表達的S蛋白與SARS康復病人血清進行抗原—抗體特異性反應實驗，如果能夠特異性的結合，說明表達成功。

(5)步驟④和⑥的結果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表達蛋白質所用的目的基因相同。