Question

【題目】蘇云金桿菌（Bt）能產生具有殺蟲能力的毒蛋白．如圖是轉Bt毒蛋白基因植物的培育過程示意圖（amp′為抗氨芐青霉素基因），①～④表示過程．請據圖作答：
（1）由HindⅢ酶切后，得到的DNA片段的末端堿基序列是 ．
（2）將圖中①所示的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，產生種DNA片段，②過程可獲得種重組DNA．如果只用BamHⅠ酶切，目的基因與質粒連接后可獲得種重組DNA．
（3）該過程中Bt毒蛋白基因插入Ti質粒后，不應影響質粒的__________（多選）．
A.復制
B.轉錄
C.堿基對的數量
D.抗性基因的表達
（4）用農桿菌的Ti質粒作運載體，目的是 ． 篩選含重組DNA的農桿菌，培養基中應添加 ．
（5）生產上常將上述轉基因作物與非轉基因作物混合播種，其目的是 ．

Answer 1

【答案】
（1）
（2）4；2；2
（3）ABD
（4）利用農桿菌Ti質粒的T﹣DNA，將Bt毒蛋白基因整合到植物細胞染色體DNA上；氨芐青霉素
（5）降低害蟲種群中抗Bt毒蛋白基因的基因頻率的增長速率
【解析】解：（1）由HindⅢ酶識別序列為 切后，因此，得到DNA片段的末端是 ．（2）圖①中，從蘇云金桿菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3種DNA片段．而質粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2種DNA片段，其中有1種與目的基因相同，所以反應管中有4種DNA片段．因HindⅢ、BamHⅠHind切割質粒可形成兩種長度不同的片段，因此用DNA連接酶連接形成的重組質粒有2種；而BamHⅠ切割質粒只能形成一種長度的片段，但可能會出現正向和反向連接，所以用DNA連接酶能連接形成2種重組質粒．（3）質粒要能進行復制才能得到更多的表達產物，所以構建基因表達載體后，不能影響質粒的復制、表達和抗性基因的表達．（4）用農桿菌的Ti質粒作運載體，目的是利用農桿菌Ti質粒的T﹣DNA，將Bt毒蛋白基因整合到植物細胞染色體DNA上．篩選含重組DNA的農桿菌，培養基中應添加氨芐青霉素．（5）生產上常將上述轉基因作物與非轉基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中抗Bt毒蛋白基因的基因頻率的增長速率． 所以答案是：（1） （2）4 2 2（3）ABD（4）利用農桿菌Ti質粒的T﹣DNA，將Bt毒蛋白基因整合到植物細胞染色體DNA上 氨芐青霉素（5）降低害蟲種群中抗Bt毒蛋白基因的基因頻率的增長速率
【考點精析】掌握基因工程的原理及技術是解答本題的根本，需要知道基因工程的原理是利用DNA重組技術．