Question

【題目】 I．為研究肝癌致病機理，利用下圖所示方法和基因工程獲取相關癌基因以進一步研究。

（1）上圖中，A過程需要用________酶，D過程需要回收________（未雜交/雜交分子）的含32P的cDNA單鏈，繼而通過人工合成，獲得________，并用其構建基因文庫。

II．上圖是治療性克隆時獲取病人胚胎干細胞的過程。

（2）細胞①是病人的體細胞（如皮膚細胞），細胞②往往是處于_________期的卵母細胞。圖示方法一和方法二都使用了去核卵母細胞，主要是因為_____________________。

（3）將分離出的胚胎干細胞放入有分化誘導因子的培養液中，誘導其分化成所需類型細胞或器官，完成該過程的實質是____________________。對于先天不能生成T細胞的免疫缺陷病人，需要誘導產生_________（填免疫器官）。

Answer 1

【答案】 逆轉錄 未雜交 雙鏈cDNA 減數第二次分裂中期 卵母細胞的細胞質可以給體細胞的細胞核提供表達全能性的環境 基因的選擇性表達 胸腺

【解析】本題考查基因工程中目的基因的提取、胚胎工程中的核移植等相關知識，解題要點是通過對圖示內容的分析，掌握教材中生物工程相關的概念和操作步驟。

圖中A過程是以mRNA為模板合成單鏈DNA過程，需要逆轉錄酶；由于正常細胞中不含癌基因，所以將正常細胞轉錄成的mRNA和肝癌細胞的mRNA逆轉錄成的cDNA混合后，含癌基因的cDNA不能形成雜交分子，將未雜交分子回收后，經人工合成的雙鏈cDNA中含有癌基因，可用其構建基因文庫。

（2）圖中方法一為核移植技術，取病人體細胞（細胞①）的核，與處于減數第二次分裂中期的卵細胞（細胞②）的質形成重組細胞。核移植中供質的細胞一般取用去核卵母細胞，是因為卵母細胞的細胞質可以給體細胞的細胞核提供表達全能性的環境，有利于細胞核全能性的表達。

（3）細胞分化的實質是基因的選擇性表達；骨髓干細胞增殖后，部分細胞遷移至胸腺中分化成T細胞，所以對于先天不能生成T細胞的免疫缺陷病人，需要誘導產生胸腺。

[點睛]：本題知識易錯點：1.如何從肝癌細胞中篩選出目的基因（癌基因）：正常細胞與癌細胞相比，不含癌基因轉錄成的mRNA，由此根據DNA分子雜交原理，可篩選出未雜交分子，即含癌基因的cDNA；2. 克隆技術的圖示方法一和方法二都使用了去核卵母細胞，主要是因為卵母細胞的細胞質可以給體細胞的細胞核提供表達全能性的環境，兩種方法得到的細胞③和④相當于受精卵，處于⑤時期的胚胎叫囊胚。