Question

【題目】鐵皮石斛是我國名貴中藥，生物堿是其有效成分之一。應用組織培養技術培養鐵皮石斛擬原球莖(簡稱PLBs，類似愈傷組織)生產生物堿的實驗流程如下：

在固體培養基上，PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養時間的變化如圖所示，請回答下列問題：

（1）選用新生營養芽為外植體的原因是____________________，誘導外植體形成PLBs的過程稱________。

（2）與黑暗條件下相比，PLBs在光照條件下生長的優勢體現在______________，______________，________________。

（3）脫落酸(ABA)能提高生物堿含量，但會抑制PLBs的生長。若采用液體培養，推測添加適量的ABA可提高生物堿產量。同學們擬開展探究實驗驗證該推測，在設計實驗方案時探討了以下問題：

①ABA的濃度梯度設置和添加方式：設4個ABA處理組，1個空白對照組，3次重復。因ABA受熱易分解，故一定濃度的無菌ABA母液應在各組液體培養基______后按比例加入。

②實驗進程和取樣：實驗50天完成，每10天取樣，將樣品(PLBs)稱重(g/瓶)后，再測定生物堿含量。如初始(第0天)數據已知，實驗過程中還需測定的樣品數為________。

③依所測定數據確定適宜的ABA濃度和培養時間：當某3個樣品(重復樣)的__________________________時，其對應的ABA濃度為適宜濃度，對應的培養時間是適應培養時間。

Answer 1

【答案】

（1）細胞分化程度低，容易誘導形成PLBs 細胞的脫分化

（2）生長起始較快 快速生長時間較長 PLBs產量較高

（3）①滅菌、冷卻

②75

③PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大

【解析】

（1）新生營養芽分裂能力強，細胞分化程度低，容易誘導形成PLBs；根據題干可知，PLBs類似愈傷組織，外植體形成愈傷組織的過程是脫分化。

（2）據圖分析，光照下PLBs的重量高于黑暗條件下，PLBs在光照條件下生長的優勢體現生長起始較快，快速生長時間較長，PLBs產量較高。

（3）①由于ABA受熱易分解，所以各種液體培養基滅菌并冷卻后才能按比例加入一定濃度的無菌ABA母液。

②分析圖解可知，4個ABA處理組，1個空白對照組，共5組，50天每10天取樣，需要取樣5次，3次重復，即5×5×3＝75。故實驗過程中還需測定的樣品數為75。

③PLBs(類似愈傷組織)重量與生物堿含量呈正相關，故當某3個樣品(重復樣)的PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大時，其對應的ABA濃度為適宜濃度，對應的培養時間是適宜培養時間。