Question

【題目】青蒿素主要從青蒿植株的地上部分提取而來，是最有效的抗瘧藥之一，最新研究表明，青蒿素還可用于糖尿病的治療．研究人員利用基因工程培育出高產的轉基因青蒿．
（1）青蒿的cDNA文庫，是以從青蒿細胞中提取的為模板，通過（方法）建立起來的．青蒿的cDNA文庫（是/否）含有青蒿基因組中的全部基因嗎？
（2）研究人員從青蒿的cDNA文庫中獲取了合成青蒿素所需的兩種關鍵酶的基因．在對這兩個目的基因分別進行PCR時，向反應體系中加入Taq酶等物質中，除了模板不同，也肯定不同．
（3）構建表達載體時，應在兩個目的基因的首端和尾端分別安插上和 ， 使目的基因能夠 ． 構建好的目的基因表達載體一般通過法而導入到青蒿細胞中，最終獲得轉基因植株．
（4）有人另辟蹊徑，成功培育出能生產青蒿素的轉基因酵母菌．試指出利用轉基因酵母菌生產青蒿素的兩點優勢： ．
（5）操作過程中需要用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ單獨或聯合切割同一種質粒，得到的DNA片段長度如圖（1kb 即1000個堿基對），請在直接在下圖的質粒上畫出EcoRⅤ、MboⅠ的切割位點．

Answer 1

【答案】
（1）mRNA；反轉錄；否
（2）引物（對）
（3）啟動子；終止子；轉錄（或表達）；農桿菌轉化
（4）酵母菌繁殖快，易培養，成本低，可以工業化生產，生產不受季節、氣候、地域限制
（5）
【解析】解：（1）cDNA文庫是以mRNA為模板，通過反轉錄的方法建立起來的．cDNA文庫屬于部分基因文庫，其只含有青蒿基因組中的部分基因．（2）采用PCR技術擴增目的基因的條件是：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）．因此，對這兩個目的基因分別進行PCR時，向反應體系中加入的物質中，除了模板不同，引物也肯定不同．（3）基因表達載體的組成包括啟動子、終止子、目的基因和標記基因等，因此構建表達載體時，應在兩個目的基因的首端和尾端分別安插上啟動子和終止子，使目的基因能夠表達．將目的基因導入植物細胞常用農桿菌轉化法．（4）利用轉基因酵母菌生產青蒿素的優勢：酵母菌繁殖快、易培養、成本低可以工業化生產、生產不受季節、氣候、地域限制．（5）根據圖示，該質粒為環形質粒．用限制酶EcoRⅤ單獨切割該質粒時，只形成一個片段，說明該質粒上只有1個限制酶EcoRⅤ的識別位點．用限制酶MboⅠ單獨切割該質粒時，形成兩個片段，說明該質粒上有兩個限制酶MboⅠ的識別位點．用限制酶EcoRⅤ和MboⅠ聯合切割該質粒時，形成三個片段，其中有一個片段的長度與用MboⅠ單獨切割該質粒時產生的片段長度相同（2.5kb），另外的兩個片段是5.5kb和6kb，這說明限制酶EcoRⅤ的切割位點存在于用MboⅠ單獨切割該質粒時產生的另一片段（11.5kb）上． 所以答案是：（1）mRNA；反轉錄；否；（2）引物（對）；（3）啟動子；終止子；轉錄（或表達）；農桿菌轉化；（4）酵母菌繁殖快，易培養，成本低，可以工業化生產，生產不受季節、氣候、地域限制；（5）
【考點精析】關于本題考查的基因工程的原理及技術，需要了解基因工程的原理是利用DNA重組技術才能得出正確答案．