Question

【題目】為解決塑料袋造成的“白色污染”這一問題，某同學試圖從土壤中尋找一種能加速塑料袋自然降解過程的目的菌，以下是該同學從土壤中尋找并篩選目的菌的流程，請回答下列問題：

（1）對培養基滅菌常用的方法是____________________。在接種前需要檢測使用的培養基是否被污染，方法是________________________。

（2）Ⅰ號培養基屬于________________（按功能分）培養基，其作用是使目的菌能“脫穎而出”。如圖采用的接種方法為________________。Ⅱ號培養基從物理性質來看，________（填“能”或“不能”）添加瓊脂。

（3）該同學在稀釋倍數為104的培養基中測得平板上菌落數的平均值為20.4，則每毫升樣品中的菌落數是________個。（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2mL）

（4）假設該同學發現培養基上細菌數目過多而連成一片,說出一種可能的原因并提出合理的處理措施。原因:______________；措施:________________________________。

Answer 1

【答案】 高壓蒸汽滅菌法 將未接種的培養基在37℃（或適宜溫度）恒溫箱中倒置培養一段時間（或1～2天），觀察是否有菌落生成 選擇 稀釋涂布平板法 不能 1.02×106 菌液濃度過高（或稀釋倍數不夠）可以通過增大稀釋倍數解決（或原因：培養過程中被雜菌污染） 嚴格無菌操作程序

【解析】試題分析：本題主要考查微生物的分離和培養相關知識點，微生物這部分內容是高考試題的一個熱點一般體現在對生物工程中的應用，考查的知識點有微生物的無菌操作、微生物的分離以及產品的提取，注意總結。

（1）培養基常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。在接種前需要檢測使用的培養基是否被污染，可以將未接種的培養基在37℃（或適宜溫度）恒溫箱中培養一段時間，觀察是否有菌落生成，若有菌落生成，則已經被污染，否則沒有被污染。
（2）要篩選能降解聚乙烯塑料的微生物，應選擇以聚乙烯塑料為唯一碳源的選擇培養基。圖Ⅱ號培養基上采用的接種方法為稀釋涂布平板法。Ⅱ號培養基為固體培養基，因此不需要加凝固劑--瓊脂。
（3）根據題意可知，每克樣品中的菌落數=平板上菌落數的平均值÷體積×稀釋倍數=20.4÷0.2×104=1.02×106個。
（4）如果培養基上細菌數目過多連成一片，可能的原因是菌液濃度過高或操作過程不是無菌操作，還可能是接種時沒有把細菌分散開，采取的措施有：可以通過增大稀釋倍數解決（或培養過程中被雜菌污染；嚴格無菌操作程序。或利用接種針劃線時，劃下一個區域前沒有對接種針滅菌處理；每劃一個新的區域都要對接種針進行滅菌處理）。