Question

【題目】羊奶中乳白蛋白含量很低，科研人員嘗試利用轉基因技術將人乳白蛋白基因導入羊胚胎的成纖維細胞核，進而培育轉基因克隆山羊。技術流程如下圖，據圖回答：

（1）圖中①過程中使用的酶有 。

（2）圖中②過程使用的方法是 。將導入成功的細胞核注入到③ 構成重組細胞，培養成早期胚胎，經圖中④ 技術可培育成轉基因克隆山羊。

（3）與預期結果相反，轉基因克隆山羊的乳汁中乳白蛋白含量依然很低。為探究其原因，研究人員從 細胞中提取總RNA，然后以 作為探針進行分子雜交，結果發現沒有出現雜交帶。

（4）研究人員對上述現象的解釋：可能由于人乳白蛋白基因 （首端、尾端）無啟動子，從而不能進行轉錄。推測要使該基因在山羊乳腺細胞中表達，須將它與 等調控組件重組起來，構建基因表達載體。

Answer 1

【答案】（1）限制酶、DNA連接酶

（2）顯微注射技術 去核卵母細胞（必須體現出無核） 胚胎移植

（3）（轉基因克隆山羊）乳腺 同位素標記的含有人乳白蛋白基因的DNA片段

（4）首端 山羊乳腺蛋白基因的啟動子

【解析】

試題分析：（1）圖中①過程為構建基因表達載體的過程，其中使用的酶有限制酶、DNA連接酶。

（2）圖中②過程表示將構建的基因表達載體導入受體細胞（胎兒的成纖維細胞），常采用顯微注射技術。構建重組細胞，需將成功導入人乳白蛋白基因的細胞核注入到去核的卵母細胞中。由重組細胞培養成的早期胚胎，需經胚胎移植技術才能培育成轉基因克隆山羊。

（3）為探究轉基因克隆山羊的乳汁中乳白蛋白含量依然很低的原因，可從（轉基因克隆山羊）乳腺細胞中提取總RNA，然后以同位素標記的含有人乳白蛋白基因的DNA片段作為探針進行分子雜交。

（4）若進行分子雜交的結果沒有出現雜交帶，可能的原因是：人乳白蛋白基因首端無啟動子，從而不能進行轉錄。要使該基因在山羊乳腺細胞中表達，須將它與山羊乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組起來，構建基因表達載體。