Question

【題目】研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達。抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達H蛋白的乳腺癌細胞的生長，目前已成為有效的生物治療手段。

（1）選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點，是因為H蛋白在成年個體的正常組織中_________（填“低表達”或“高表達”）。H蛋白是一個跨膜蛋白，結構如圖所示。制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時，應構建_________區基因，轉入原核細胞表達并提純。

（2）將H蛋白注射到小鼠體內，取該小鼠的脾臟細胞與_________細胞進行融合，使用的化學誘導劑是_________，細胞融合的原理是_________。

（3）將融合細胞在_________培養基中培養，一段時間后培養基中只有雜交瘤細胞生長。將雜交瘤細胞轉到多孔培養板上培養，應用_________技術進行抗體陽性檢測。經多次篩選，就能得到產生單克隆抗體的雜交瘤細胞。

（4）將篩選得到的雜交瘤細胞，經過_________或小鼠腹腔內培養，獲取大量的單克隆抗體。

（5）治療乳腺癌時，可單獨使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物 結合構建“生物導彈”，殺死癌細胞。這充分體現了單克隆抗體_________的特點。

Answer 1

【答案】 低表達 胞外 骨髓瘤 PEG（或聚乙二醇） 細胞膜的流動性 選擇 抗原一抗體雜交 體外培養 特異性強（識別抗原部位專一）

【解析】本題涉及到基因工程、細胞融合技術、單克隆抗體的制備等知識點。主要考察的是單克隆抗體的制備過程，在此過程中有兩次篩選，一次是在選擇培養上得到雜交瘤細胞，第二次是進行克隆化培養和專一抗體檢測陽性，篩選出能夠產生特定抗體的雜交瘤細胞。

（2）制備單克隆抗體的過程中，應把小鼠的脾臟細胞與骨髓瘤細胞進行融合，使用的化學誘導劑為聚乙二醇，細胞融合時遵循的生物學原理是細胞膜的流動性。

（3）融合后的細胞有多種，需要在選擇培養基中進行篩選，只有雜交瘤細胞能夠生長；在多孔培養板上，吸取克隆生長的細胞培養孔中的上清液進行檢測，檢測時采用的方法是抗原-抗體雜交的方法。

（4）雜交瘤細胞進行培養時可以采用體外培養或小鼠腹腔中進行培養的方法，可以獲得大量的單克隆抗體。