Question

【題目】人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

（1）htPA基因與載體用______________切割后，通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用______________技術。

（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其___________。采集的精子需要經過___________，才具備受精能力。

（3）將重組表達載體導入受精卵常用的方法是_____________。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行_____________。利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉基因個體，這體現了早期胚胎細胞的_____________。

（4）若在轉ht-PA基因母羊的羊乳中檢測到_____________，說明目的基因成功表達。

Answer 1

【答案】（1）同種限制性核酸內切酶（或同種限制酶） DNA分子雜交（或核酸探針）

（2）超數排卵 獲能

（3）顯微注射法 性別鑒定 全能性

（4）htPA（或人組織纖溶酶原激活物）

【解析】（1）htPA基因與載體需要用同種限制性核酸內切酶（或同種限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用DNA分子雜交（或核酸探針）技術，原理是堿基互補配對。

（（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數排卵。采集的精子需要經過獲能（處理），才具備受精能力。

（3）將目的基因導入受精卵的方法是顯微注射法，為獲得母羊，所以胚胎移植前需要進行性別鑒定，利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉基因個體，這體現了早期胚胎細胞的全能性。

（4）基因表達成功時可獲得目的基因的產物，既在轉htPA基因母羊的羊乳中檢測到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說明目的基因成功表達。