Question

【題目】草甘膦是一種廣譜除草劑，其除草機制是抑制植物體內EPSPS酶的合成，最終導致植物死亡。但是，它的使用有時也會影響到農作物的正常生長。目前，已發現可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因，若將該基因轉入農作物植物細胞內，從而獲得的轉基因植物就能耐受高濃度的草甘膦。

（1）下圖A-F表示6株植物，其中，植物A和D對草甘膦敏感，B和E對草甘膦天然具有抗性，C和F則經過了轉基因處理，但是否成功還未知。若ABC澆清水，DEF澆的水中含有草甘膦，上述DEF植物中，肯定能健康成長的是 。

（2）限制酶是基因工程必需的工具酶，其作用是。

（3）將圖1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應管中有 種DNA片段。

（4）假設圖1中質粒原來BamHⅠ識別位點的堿基序列變為了另一種限制酶BclⅠ的堿基序列，現用BclⅠ和HindⅢ切割質粒，則該圖1中①的DNA右側還能選擇BamHⅠ進行切割，并能獲得所需重組質粒嗎？ 請說明理由 。

（5）若上述假設成立，并成功形成重組質粒，則重組質粒（ ）

A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切開

B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切開

C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切開

D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切開

（6）圖2中不同組織細胞的相同DNA進行過程③時啟用的起始點 （在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中選擇），其原因是 。

（7）要想檢測導入的EPSPS基因是否表達，在分子水平上可用 方法進行檢測。

Answer 1

【答案】（1）E

（2）能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開

（3）4 （4）能 切割后露出的黏性末端相同

（5）D

（6）不完全相同 不同組織細胞中基因會進行選擇性表達

（7）抗原-抗體雜交

【解析】

試題分析：（1）在DEF中因為E具有草甘膦抗性所以肯定能存活，而D敏感不能成活，F是否轉入成功不知道，所以不一定能成活。

（2）限制酶的作用是能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。

（3）將圖1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，從蘇云金桿菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3種DNA片段．而質粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2種DNA片段，其中有1種與目的基因相同，所以反應管中有4種DNA片段。

（4）由圖可知限制酶BamHⅠ和BclⅠ切割后的黏性末端相同，所以當用BclⅠ和HindⅢ切割質粒，則該圖1中①的DNA右側還能選擇BamHⅠ進行切割，所以是能。

（5）因為重新形成的重組質粒中沒有了BamHI識別的序列，所以不能被其切開，但HindIII沒有改變，所以可以被其切割，故D正確。

（6）由圖可知③是轉錄，所以在不同組織細胞的相同DNA進行過程③時啟用的起始點不完全相同，因為不同組織細胞中基因會進行選擇性表達。

（7）要想檢測基因是否表達應采用抗原-抗體雜交技術。