Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）早在北宋年間，我國就有紅棗酒釀造的相關記載，其基本工藝流程為：洗凈消毒—破碎榨汁—加曲發酵—過濾陳釀。回答下列問題：

（1）消毒過程中可以用__________溶液浸泡適當時間，再用清水沖洗。

（2）為獲得品質較高的紅棗汁，可加入果膠酶，能生產果膠酶的微生物有__________，與細菌培養基不同，該微生物生長要求的酸堿環境是__________。配制的培養基應在高壓蒸汽滅菌__________（前/后）調節酸堿度。果汁制作后可用__________鑒別是否仍有較多果膠存在。

（3）在澄清果汁中加純種酵母液，在__________________條件下產生酒精和二氧化碳。待靜置一段時間后，用__________法取出上清液。

（二）人胰島素基因的克隆操作過程如右圖所示，其中mRNA逆轉錄形成的DNA稱為cDNA。回答下列問題：

（1）提取分離組織細胞中的人胰島素mRNA時，最應選擇________細胞，過程①②需要原料是________。

（2）通過將所有的cDNA構建基因表達載體，去感染細菌，可以建立包括目的基因在內的__________，若使用質粒載體，其上存在__________基因，有助于質粒進入受體細胞中。此過程還可以使用_______作為載體。（A.動物病毒 B.植物病毒 C.噬菌體）。

（3）除了上述方法外，還可以使用__________方法擴增目的基因。不同的是，后者的目的基因若為人胰島素原基因，需要導入__________（填“真核”或“原核”）受體細胞中。

Answer 1

【答案】 高錳酸鉀 蘋果青霉（或黑曲霉） 中性偏酸 前 95%乙醇 無氧 虹吸 胰島β（細胞） （四種）脫氧核糖核苷酸 基因文庫 控制質粒DNA轉移的（基因） C PCR 真核

【解析】試題分析：本題考查微生物的培養與利用、果酒的制作、基因工程，考查對微生物培養、果酒制作、目的基因獲取原理的理解，解答此題，可根據真核細胞和原核細胞基因結構的不同分析人胰島素原基因應導入的受體細胞。

（1）紅棗的消毒可用高錳酸鉀溶液浸泡適當時間。

（2）蘋果青霉（或黑曲霉）能生產果膠酶。細菌生長要求中性偏堿的環境，霉菌生長要求中性偏酸的環境。配制的培養基應在高壓蒸汽滅菌前調節酸堿度。果膠不溶于乙醇，果汁制作后可用95%乙醇鑒別是否仍有較多果膠存在。

（3）酵母菌在無氧條件下通過無氧呼吸產生酒精和二氧化碳。發酵一段時間后，用虹吸法取出上清液。

（二）（1）人體細胞中只有胰島β細胞可表達胰島素基因，提取人胰島素mRNA時，最應選擇胰島β細胞，過程①②為合成DNA的過程，需要（四種）脫氧核糖核苷酸為原料。

（2）通過將所有的cDNA構建基因表達載體，去感染細菌，可以建立包括目的基因在內的基因（cDNA）文庫；若使用質粒載體，其上應存在控制質粒DNA轉移的基因，有助于質粒進入受體細胞中。噬菌體可侵染細菌，動物病毒、植物病毒不能侵染細菌，此過程還可以使用噬菌體作為載體。

（3）用PCR技術可擴增目的基因。PCR擴增的人胰島素原基因含有內含子序列，原核細胞中缺少轉錄后切除內含子對應序列的機制，因此應將人胰島素原基因，需要導入真核受體細胞中。