Question

【題目】熒光原位雜交可用熒光標記的特異 DNA 片段為探針,與染色體上對應的DNA片段結合,從而將特定的基因在染色體上定位。請回答下列問題:

（1）DNA熒光探針的制備過程如圖1所示，DNA酶Ⅰ隨機切開了核苷酸之間的 鍵，從而產生切口，隨后在DNA聚合酶Ⅰ作用下，以熒光標記的 為原料,合成熒光標記的DNA探針。

（2）圖2表示探針與待測基因結合的原理。先將探針與染色體共同煮沸，使DNA雙鏈中 鍵斷裂，形成單鏈。隨后在降溫復性過程中，探針的堿基按照 原則,與染色體上的特定基因序列形成較穩定的雜交分子。圖中兩條姐妹染色單體中最多可有 條熒光標記的DNA片段。

（3）A、B、C 分別代表不同來源的一個染色體組，已知AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標記。若植物甲(AABB)與植物乙(AACC)雜交，則其F1有絲分裂中期的細胞中可觀察到 個熒光點；在減數第一次分裂形成的兩個子細胞中分別可觀察到 個熒光點。

Answer 1

【答案】

（1）磷酸二酯 脫氧核苷酸

（2）氫 堿基互補配對 4

（3）6 2和4

【解析】

試題分析：

（1）如圖所示，DNA酶Ⅰ處理后將DNA分成一個個DNA片段，說明DNA酶Ⅰ切開了核苷酸之間的磷酸二酯鍵。DNA聚合酶Ⅰ催化DNA的合成，以熒光標記的脫氧核苷酸為原料，合成熒光標記的DNA探針。

（2）高溫能夠使DNA雙鏈間的氫鍵斷裂，形成單鏈。在降溫復性過程中，探針的堿基按照堿基互補配對原則，與待測基因序列形成穩定的雜交分子。兩條姐妹染色單體含有4個DNA分子，分別與DNA探針互補，最多形成4條熒光標記的DNA片段。

（3）植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則F1染色體組成是AABC，由于AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標記，所以F1有絲分裂中期，其有4個A和2個B被標記，則可觀察到6個熒光點，減數分裂第一次分裂形成的兩個子細胞的染色體組成為AB和AC，或A和ABC，由于染色體經過復制，則兩個子細胞中含有2個A、2個B或2個A，則可觀察到2和4個熒光點。