Question

【題目】測定水樣是否符合飲用水的衛生標準，常用濾膜法測定大腸桿菌的總數。大腸桿菌在含有伊紅美藍的固體培養基（EMB培養基）上長出的菌落呈黑色。如圖所示，濾膜法的大致流程：用濾膜過濾待測水樣→水樣中的細菌留在濾膜上→將濾膜轉移到EMB培養基上培養→統計菌落數目。據圖回答問題。

（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，其中需要經過滅菌處理的是________________。與過濾有關的操作都要在酒精燈火焰旁進行。

（2）待測水樣過濾完之后，還有部分細菌吸附在濾杯杯壁上，將這部分細菌也盡可能集中到濾膜上的操作為___________________________。

（3）將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養基上，這屬于微生物培養中的_________操作。從功能上看，EMB培養基屬于________培養基。

（4）無菌操作下將90ml無菌水加入到10ml待測水樣中，這樣就將待測水樣稀釋了______倍，將稀釋后的菌液通過濾膜法測得EMB培養基上的菌落數為45，黑色菌落為5，則1升待測水樣中的大腸桿菌數目為________個。

（5）若要測定待測水樣中酵母菌的數目，應更換上述過濾裝置中的濾膜，選擇孔徑________（填“更大”或“更小”）的濾膜。

Answer 1

【答案】 濾杯、濾膜和濾瓶 無菌條件下用無菌水沖洗濾杯，再次過濾 接種 鑒別 10 500 更大

【解析】試題分析：濾膜法是檢測水樣中大腸細菌群的方法。將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經過抽濾，細菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍培養基上，經培養后計數和鑒定濾膜上生長的大腸菌群菌落，依據過濾水樣計算每升或每100毫升水樣中的大腸菌群數。操作簡單、快速，主要適用于雜質較少的水樣。

（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，這些實驗儀器都需要經過滅菌處理，與過濾有關的操作都要在酒精燈火焰旁進行，防止雜菌的污染。

（2）待測水樣過濾完之后，還有部分細菌吸附在濾杯杯壁上，此時可以在無菌條件下，用無菌水沖洗濾杯，再次過濾，將這部分細菌也盡可能集中到濾膜上。

（3）將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養基上，屬于微生物培養中的接種操作。從功能上看，該培養基中含有伊紅美藍，因此EMB培養基屬于鑒別培養基。

（4）無菌操作下將90ml無菌水加入到10ml待測水樣中，這樣就將待測水樣稀釋了10倍；根據大腸桿菌鑒定的原理可知，黑色菌落為大腸桿菌，因此1升待測水樣中的大腸桿菌數目=5×（1000÷10）=500個。

（5）若要測定待測水樣中酵母菌的數目，酵母菌屬于真核生物，大腸桿菌屬于原核生物，真核細胞的直徑比原核細胞大，因此應更換上述過濾裝置中的濾膜，選擇孔徑更大的濾膜。