Question

【題目】EPO是促紅細(xì)胞生成素（Erythropoietin）的英文簡稱，是一種激素樣物質(zhì)，可促進(jìn)體內(nèi)新紅細(xì)胞生成。人類已可通過基因工程合成EPO基因，并采用中國倉鼠卵巢（CHO）細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)來獲取產(chǎn)物。其過程如下：

請回答下列問題：

（1）從人體組織中提取EPO的mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄得到____________，再通過PCR技術(shù)獲得大量EPO基因。

（2）供體母鼠通常情況下每次排卵8～12枚，為使其超數(shù)排卵，需注射_____________激素 以排出更多的卵子，培養(yǎng)到_____________時期與獲能的精子相遇時，精子首先發(fā)生___________反應(yīng)，穿越放射冠和透明帶，完成體外受精。

（3）①過程構(gòu)成了基因表達(dá)載體，內(nèi)部包括不可缺少的組成部分，其中___________能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。 （4）采用________技術(shù)，將重組表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠受精卵中，將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)液成分除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及_______等物質(zhì)。

（5）當(dāng)胚胎發(fā)育至__________時期，向受體移植，為獲得更多個轉(zhuǎn)基因胚胎，要將__________均等切割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。此外，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行_________。

Answer 1

【答案】（1）cDNA

（2）促性腺，減數(shù)第二次，頂體

（3）啟動子

（4）顯微注射，血清

（5）桑椹胚或囊胚，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，性別鑒定

【解析】（1）獲取目的基因的方法可通過反轉(zhuǎn)錄法，故從人體組織中提取EPO的mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，再通過PCR技術(shù)獲得大量EPO基因。

（2）為使供體母鼠超數(shù)排卵，需注射促性腺激素以排出更多的卵子，卵子需培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時才能與獲能的精子相遇時，精子首先發(fā)生頂體反應(yīng)，穿越放射冠和透明帶，完成體外受精。

（3）①過程為形成基因表達(dá)載體的過程，基因表達(dá)載體包括啟動子、終止子等，其中啟動子為RNA聚合酶結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。

（4）

（5）胚胎移植時一般在桑椹胚或囊胚時期，為獲得更多轉(zhuǎn)基因胚胎，要將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等切割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。此外，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定。