Question

【題目】基因工程在農業中的應用發展迅速，基因可導入農作物中，用于改良該農作物的性狀．通過多重PCR技術可擴增并檢測轉基因農作物的外源基因成分．多重PCR是在一個PCR反應體系中加入多對引物，針對多個DNA模板或同一模板的不同區域，擴增多個目的基因的PCR 技術．請回答：
（1）我國科學家將Bt毒蛋白基因、魚的抗凍蛋白基因、控制果實成熟的基因導入農作物，可獲得、、延熟的轉基因作物．
（2）引物是根據的一段核苷酸序列合成的，每種基因擴增需要一對引物的原因是 ． 表是A、B、C三種基因的引物，據表分析，引物特異性主要體現在 ．

A基因	引物1	5′GCTCCTACAAATGCCATCATTGC3′
	引物2	5′GATAGTGGGATTGTGCGTCATCCC3′
B基因	引物1	5′TGAATCCTGTTGCCGGTCTT3′
	引物2	5′AAATGTATAATTGCGGGACTCTAATC3′
C基因	引物1	5′CCTTCATGTTCGGCGGTCTCG3′
	引物2	5′GCGTCATGATCGGCTCGATG3′

（3）PCR過程中溫度從90℃降到55﹣60℃的目的是 ．
（4）檢測人員通過多重PCR技術確定農作物中是否含有A、B、C三種轉基因．將A、B、C三種基因和待測的農作物基因樣品進行PCR，擴增后的產物再進行電泳，結果如圖．據圖分析：含有三種轉基因的農作物是 ， 判斷依據是 ．
（5）與PCR技術相比，多重PCR技術的優勢是

Answer 1

【答案】
（1）抗蟲；抗凍
（2）已知目的基因；需要一對特異性的引物，要求一對引物的序列是不互補的，否則會形成引物二聚體，進而影響目的基因的擴增；引物特異性是引物中特定的堿基序列， 可以體現的特異性
（3）加熱至90～95℃利于DNA解鏈；冷卻到55～60℃，利于引物結合到互補DNA鏈．
（4）4；PCR過程中，可以通過設計特定的引物來擴增特定的DNA片段，1組為已知A、B、C三種基因的對照，其中4含有A基因、B基因和C基因，但2只含有A基因和C基因，3不含有這三種基因
（5）a、確保所有的靶位點可以用相同的PCR程序在單個反應中得到有效的擴增．b、在使用相同的PCR程序和反應條件的單個PCR中對每對引物的量進行優化，以達到最大的擴增效率．c、平衡多重PCR中每對引物的量，使之對每個靶點都能獲得足夠的擴增量．
【解析】解：（1）Bt毒蛋白基因的抗蟲基因，可以表達出毒蛋白．魚的抗凍蛋白基因可以表達出抗凍蛋白、控制果實成熟的基因可以表達出控制早熟的相關的蛋白，因此將Bt毒蛋白基因、魚的抗凍蛋白基因、控制果實成熟的基因導入農作物，可獲得抗蟲、抗凍、延熟的轉基因作物．（2）PCR擴增技術的前提是要用一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據這一段序列合成引物，每種基因擴增需要一對特異性的引物，要求一對引物的序列是不互補的，否則會形成引物二聚體，進而影響目的基因的擴增．據表中A、B、C三種基因的引物核苷酸序列分析，引物特異性是引物中特定的堿基序列， 可以體現的特異性．（3）PCR過程中溫度加熱至90～95℃利于DNA解鏈；冷卻到55～60℃，利于引物結合到互補DNA鏈．（4）PCR過程中，可以通過設計特定的引物來擴增特定的DNA片段，1組為已知A、B、C三種基因的對照，其中4含有A基因、B基因和C基因，但2只含有A基因和C基因，3不含有這三種基因．（5）與PCR技術相比，多重PCR技術的優勢是：a、確保所有的靶位點可以用相同的PCR程序在單個反應中得到有效的擴增．b、在使用相同的PCR程序和反應條件的單個PCR中對每對引物的量進行優化，以達到最大的擴增效率．c、平衡多重PCR中每對引物的量，使之對每個靶點都能獲得足夠的擴增量． 所以答案是：（1）抗蟲；抗凍；（2）已知目的基因；需要一對特異性的引物，要求一對引物的序列是不互補的，否則會形成引物二聚體，進而影響目的基因的擴增；引物特異性是引物中特定的堿基序列， 可以體現的特異性；（3）加熱至90～95℃利于DNA解鏈；冷卻到55～60℃，利于引物結合到互補DNA鏈．；（4）4；PCR過程中，可以通過設計特定的引物來擴增特定的DNA片段，1組為已知A、B、C三種基因的對照，其中4含有A基因、B基因和C基因，但2只含有A基因和C基因，3不含有這三種基因；（5）a、確保所有的靶位點可以用相同的PCR程序在單個反應中得到有效的擴增．b、在使用相同的PCR程序和反應條件的單個PCR中對每對引物的量進行優化，以達到最大的擴增效率．c、平衡多重PCR中每對引物的量，使之對每個靶點都能獲得足夠的擴增量．
【考點精析】掌握基因工程的原理及技術是解答本題的根本，需要知道基因工程的原理是利用DNA重組技術．