Question

【題目】α—抗胰蛋白酶是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)基因母羊的乳汁中獲得。流程如圖29:

（1）目的基因與表達(dá)載體用 切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。

（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其 。采集的精子需要經(jīng)過 ,才具備受精能力。

（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是 。為了獲得母羊，移植前需對巳成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行 。利用 和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體。

（4）檢測目的基因是否已轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可采用 技術(shù)。若要檢測羊乳汁中是否含α-抗胰蛋白酶，需用 法,若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品。

Answer 1

【答案】（1）同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）

（2）超數(shù)排卵 獲能（處理）（1分）

（3）顯微注射法 性別鑒定 胚胎分割

（4）分子雜交 抗原—抗體雜交

【解析】（1）基因工程的核心步驟就是將目的基因與載體重組構(gòu)建基因表達(dá)載體，要用同種限制性核酸內(nèi)切酶。

（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過獲能（處理），才具備受精能力。

（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是顯微注射法．為了獲得母羊，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定，以選擇母羊的胚胎進(jìn)行移植．利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體。

（4）檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，利用分子雜交技術(shù)；檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，利用抗原-抗體雜交技術(shù)。