Question

【題目】人參是珍貴的藥用植物，研究人員運用轉基因技術構建乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人參細胞表達系統，為珍貴藥用植物與疫苗聯合應用開辟了新思路，其構建過裎如圖所示，圖中SmaⅠ、SstⅠ、EcoRV為限制酶。請回答相關問題：

（1）②的構建過程除限制酶外還需要_________酶；想要從②中重新獲得HBsAg基因，所用的限制酶不能是EcoRV或SmaⅠ，原因是_____________________________。

（2）將重組質粒轉入農桿菌常用__________處理細胞；要使目的基因成功整合到人參細胞的染色體上，該過程所采用的質粒應含有____________________。

（3）分析圖可知，②中應含有的標記基因是_______________；過程⑤的目的是______________。

（4）該疫苗進入機體后可刺激機體產生能與乙肝病毒特異性結合的_____________，同時還能產生______使機體長期對乙肝病毒具有免疫力。

Answer 1

【答案】 DNA連接 兩平末端連接后的重組序列不能再被EcoR V和Sma Ⅰ識別（重組質粒無這種限制酶的識別序列） 鈣離子（Ca2+) T-DNA 氨芐青霉素抗性基因 篩選出含有HBsAg基因的人參細胞 抗體 記憶細胞

【解析】試題分析：本題主要考查基因工程、免疫調節。要求學生熟知基因工程的操作過程，尤其是限制酶的選擇，以及體液免疫的過程。

（1）②為基因表達載體的構建，除需要限制酶外還需要DNA連接酶；EcoRV、SmaⅠ切割后得到的是平末端，然后用DNA連接酶連接后，所形成的重組序列不能再被EcoR V和Sma Ⅰ識別。

（2）將目的基因轉入微生物的方法是鈣離子處理細胞；農桿菌的質粒中含有一段可以轉移的DNA，即T-DNA，它能將目的基因成功整合到人參細胞的染色體上。

（3）⑤過程中是將受體細胞放入氨芐青霉素中培養，以篩選出含有HBsAg基因的人參細胞，因此②中應含有的標記基因是氨芐青霉素抗性基因。

（4）在體液免疫中，疫苗可以刺激機體產生相應的抗體，同時還能產生記憶細胞使機體長期對乙肝病毒具有免疫力。