Question

【題目】埃博拉病毒是一種強致病性RNA病毒，以埃博拉病毒外殼某蛋白為主要抗原制備疫苗和抗體是預防和診療埃博拉出血熱的一種有效策略。其疫苗生產和抗體制備的流程之一如圖：

（1）過程①需要在______________酶的催化下合成DNA，將獲得的DNA與載體連接后導入受體菌群建立病毒的_________文庫，再從中篩選出A基因。

（2）過程②利用PCR技術擴增A某因時，需在_________酶的作用下進行，PCR技術的原理是_________。

（3）過程③采用的技術手段是_________，獲得的X是_________。

（4）可選用圖中基因工程生產的_________所制備的疫苗注射到健康人體內，對埃博拉病毒進行免疫預防，對該傳染病疑似患者確診時，可從疑似患者體內分離病毒，與圖中的_________進行特異性結合檢測。

Answer 1

【答案】 逆轉錄 基因組 熱穩定DNA聚合（Taq） DNA雙鏈復制 動物細胞融合 雜交瘤細胞 A蛋白 抗A蛋白的單克隆抗體

【解析】試題分析：本題難度不大，綜合性較強，考查了基因工程、單克隆抗體的制備、PCR技術、動物細胞培養等相關知識，要求學生生具有扎實的基礎知識，并構建一定的知識網絡。圖示過程中，①表示逆轉錄形成DNA的過程；②表示獲取A（目的）基因的過程；③表示細胞融合的過程，X為雜交瘤細胞。PCR技術的過程：高溫變性、低溫復性、中溫延伸。條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）。

（1）埃博拉病毒的遺傳物質是RNA，過程①代表的是逆轉錄的過程，需要在逆轉錄酶的催化下合成DNA。基因文庫是指將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導入到受體菌的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因。基因組文庫包含某種生物所有的基因；部分基因文庫包含某種生物的部分基因。將獲得的DNA與載體連接后導入受體菌群建立病毒的基因組文庫，再從中篩選出A基因。

（2）利用PCR技術擴增A基因時，根據A基因兩端的部分核苷酸序列設計引物序列，加入引物的作用是與A基因單鏈相應互補序列結合，然后在熱穩定DNA聚合（Taq）作用下進行延伸。PCR技術所依據的原理是DNA雙鏈復制。

（3）③過程需要采用動物細胞融合技術，根據圖中信息可知X為雜交瘤細胞。

（4）圖中的A蛋白相當于抗原，因此可選用圖中基因工程生產的A蛋白所制備的疫苗對健康人進行該傳染病進行免疫預防。對該傳染病疑似患者確診時，可以從疑似患者體內分離出病毒，與圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進行特異性結合檢測。