Question

【題目】我國科學家利用農桿菌介導法，將含高賴氨酸蛋白基因sb401的表達載體導入玉米細胞，最終培育出“轉高賴氨酸蛋白基因sb401玉米”。結合圖示回答問題：

（1）構建基因表達載體時，為了便于sb401基因與Ti質粒連接，應怎樣處理含該基因的DNA分子和質粒？_____________________________________________。

（2）為了使③過程順利進行，常用一定的方法處理農桿菌，使其處于_________________，以利于質粒的導入。為了培養出能穩定遺傳的高賴氨酸轉基因玉米，應將目的基因插入到農桿菌的_________上，便于使目的基因整合到水稻的___________上，通過組織培養得到轉基因植株后，再進行____________即可得到穩定遺傳的高賴氨酸轉基因玉米。

（3）⑤為__________過程，除了為其提供適宜的溫度、pH、必需的營養條件、植物激素、無菌條件外，通常還需_________________。

Answer 1

【答案】 分別用相對應的同一種限制酶同時切割含該基因的DNA分子和質粒 感受態 Ti質粒的T-DNA 染色體 連續自交、篩選 脫分化 適宜的溫度、pH、營養條件、植物激素、無菌條件

【解析】試題分析：分析題圖：圖中①表示目的基因的獲取，②表示基因表達載體的構建過程，③④表示采用農桿菌轉化法將目的基因導入植物細胞；⑤表示脫分化過程；⑥表示篩選；⑦表示再分化形成完整植株的過程。

（1）構建基因表達載體時，需用同一種限制酶同時切割含該基因的DNA分子和質粒，以產生相同的黏性末端，這樣便于sb401基因與Ti質粒連接。

（2）過程③將目的基因導入微生物（農桿菌）細胞常用感受態轉化法，即用鈣離子（或氯化鈣）溶液處理農桿菌，使其轉化為易于吸收周圍環境中DNA分子的感受態。農桿菌的Ti質粒上有可轉移DNA（T-DNA），因此應該將目的基因插入該DNA，以便將目的基因整合到水稻的染色體DNA上；將含有目的基因的水稻細胞通過植物組織培養技術培養，在利用連續自交、篩選的方法可以獲得穩定遺傳的高賴氨酸轉基因玉米。

（3）過程⑤為脫分化形成愈傷組織的過程，該過程需要適宜的溫度、pH、營養條件、植物激素、無菌條件等，且需要避光培養。