Question

【題目】下表為幾種限制酶識別的序列和切割的位點。如下圖，己知某DNA在目的基因的兩端1、2、3、4四處有BamHⅠ或EcoRI或PstI的酶切位點。現(xiàn)用PstI和EcoRI兩種酶同時切割該DNA片段（假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開），下列各種酶切位點情況中，可以防止酶切后單個含目的基因的DNA片段自身連接成環(huán)狀的是

A．1為EcoRⅠ,2為BamHI,3為EcoRI,4為PstI

B．1為BamHI，2為EcoRI,3為EcoRI,4為PstI

C．1為BamHI,2為EcoRI,3為PstI,4為EcoRI

D．1為EcoRI,2為PstI，3為PstI,4為BamHI

Answer 1

【答案】C

【解析】由題意可知先用PstI和EcoRI兩種酶同時切割該DNA片段。如果1為EcoRⅠ,2為BamHI,3為EcoRI,4為PstI將會在1和 3處將目的基因切割，會產(chǎn)生相同的黏性末端，A錯誤。如果1為BamHI，2為EcoRI,3為EcoRI,4為PstI，將在2和 3處將目的基因切割，產(chǎn)生的是黏性末端，B錯誤。如果1為BamHI,2為EcoRI,3為PstI,4為EcoRI在2和3切割目的基因，此時產(chǎn)生的黏性末端不同，可以防止環(huán)化，C正確。如果1為EcoRI,2為PstI，3為PstI,4為BamHI會在2和3位置切割掉目的基因，產(chǎn)生的相互的黏性末端，D錯誤。