Question

【題目】受損傷的馬鈴薯細胞內酚氧化酶（PPO）和底物（酚類物質）直接接觸，引起馬鈴薯的褐變，為探究溫度對PPO活性的影響，實驗小組進行如下實驗：

（1）PPO粗提液的提取在________（填“低溫”或“高溫”）條件下將新鮮馬鈴薯用蒸餾水洗凈、去皮，取20g樣品放入含50mL磷酸緩沖液（pH值為5.5）的研缽中，同時加入少量石英砂，研磨、離心、上清液即為PPO的粗提液，加緩沖液研磨的目的是________

（2）不同溫度下PPO活性的測定

步驟順序	試管1	試管2	試管3	試管4	試管5	試管6	試管7	試管8
PPO粗提液	2mL		2mL		2mL		2mL
酚類底物		2mL		2mL		2mL		2mL
反應	混合振蕩		混合振蕩		混合振蕩		混合振蕩
溫度預處理	（5min）0℃		15℃		30℃		45℃
保溫時間	5min		5min		5min		5min
記錄結果	+		++++		++++		++

（注：反應底物充足；實驗結果中“+”越多褐色越深）

①實驗步驟順序有不妥之處，請改正________。

②實驗結果表明：15℃和30℃溫度條件，PPO具有相同的活性，從酶的特性分析其原因是________。

③為進一步探究PPO最適溫度，應在________范圍內設置溫度梯度。

（3）I．在溫度30℃的條件下，取等量提取液分別加到四支盛有等量過氧化氫溶液、pH分別為3、5、7、9的試管中，結果發現每一支試管都產生氣體。請回答：

①該實驗的課題是：________。

②各實驗組均在30℃下進行的原因是：a________；b_______。

Ⅱ．將加入4支試管中的馬鈴薯提取液的量減半，重復實驗I．分別測定實驗I、Ⅱ中過氧化氫在相同時間內的含量變化，繪制成如圖所示曲線，請回答：曲線A是實驗________（選填I或Ⅱ）的結果。據圖能否說明實驗I、Ⅱ中酶活性不同？_______。

Answer 1

【答案】低溫 保持PPO的活性（防止PPO失活） “反應”步驟改在“溫度預處理”之后 在酶的最適溫度前后，可以有相同的催化效率 15℃30℃ 探究不同pH對過氧化氫酶活性的影響 30℃是過氧化氫酶作用的適宜溫度 排除溫度變化（無關變量）對實驗結果的影響 Ⅱ 不能

【解析】

影響酶促反應速率的因素主要有：溫度、pH、底物濃度和酶濃度．在底物的量充足時，隨著酶濃度的增加，酶促反應速率逐漸加快，即縮短到達化學反應平衡點的時間，但酶不會改變化學反應的平衡點。

（1）提取酶時，都要求低溫，防止酶活性喪失，加緩沖液作用：使溶液pH值保持相對穩定，保持PPO的活性。

⑵① “溫度預處理”之后進行反應，才能保證各個試管是在不同溫度下測定PPO活性。

②15℃和30℃溫度條件，PPO具有相同的活性原因：在酶的最適溫度前后，可以有相同的催化效率 。

③15℃～30℃范圍內，PPO活性較高，所以在該溫度范圍內，有PPO的最適溫度。

(3)①該題自變量是不同pH值，因變量為酶活性，所以實驗目的是探究不同pH對過氧化氫酶活性的影響。

②30℃是過氧化氫酶的適宜溫度，恒溫是排除溫度變化（無關變量）對實驗結果的影響。

(4) A、B曲線相同時間情況下，底物剩余量最多，說明酶量更少，選擇Ⅱ組實驗。

(5)該實驗不能說明酶活性在這個實驗中的變化情況，酶量的大小沒有影響酶的最適pH值。