Question

【題目】〔生物—選修3:現代生物科技專題〕下圖是綠色熒光蛋白轉基因克隆豬的培育過程示意圖,請據圖同答:

(1)分析可知，科學家獲取綠色熒光蛋白基因所運用的限制酶是圖中所示的________。最終獲得的綠色熒光蛋白基因的末端類型屬于_____。構建基因表達載體的目的是_____，基因表達載體的組成含有復制原點、目的基因、啟動子、__________。

(2)圖示工程中，將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞，常用的方法是__________。

(3)圖示中,作為受體細胞的去核卵母細胞一般處在______期，常通過_______(物理方法)進行激活,使其完成減數分裂和發育進程。

Answer 1

【答案】 PstⅠ和EcoRⅠ 黏性末端 使目的基因在受體細胞中穩定存在并遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發揮作用 終止子和標記基因 顯微注射法 MⅡ中（減數第二次分裂中） 電脈沖（或電刺激）

【解析】本題主要考查基因工程以及核移植，基本屬于識記內容。要求學生熟記基因工程和核移植的操作步驟，以及理解目的基因獲取中限制酶的選擇方法。

（1）圖中所示的限制酶PstI和EcoRⅠ可以切割DNA片段，獲取綠色熒光蛋白基因，并不能破壞目的基因．限制酶切割產生的DNA片段末端不平整，即末端為黏性末端。構建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩定存在并遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發揮作用。基因表達載體的組成含有復制原點、目的基因、啟動子、終止子和標記基因。
（2）如圖示將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞的過程，因受體細胞為動物細胞，常用的方法是顯微注射法。
（3）受體細胞一般取處在MⅡ中（減數第二次分裂中）期的去核卵母細胞作為受體細胞，通過電脈沖（或電刺激）進行激活，使其完成減數分裂和發育進程．