Question

【題目】轉基因抗蟲棉是人們應用較早的基因重組技術推廣項目，目前轉基因技術有了新的改進，如下圖所示。請根據所學知識回答：

（1）圖中轉基因過程通常選擇的限制酶是_____________，啟動子的作用是與__________識別和結合，從而驅動基因的轉錄過程。目的基因與載體結合主要依靠二者含有共同的_____________，將目的基因導入圖中受體細胞一般采用_____________。

（2）圖中需要進行離體組織培養(yǎng)的過程是__________（用標號）。由棉株1獲得單倍體苗的途徑為：花粉通過誘導首先形成__________進而再分化為試管苗。植物組織培養(yǎng)的原理是每個細胞都具有__________的特點。在生物的生長發(fā)育過程中，由于細胞中____________，可分化為不同的組織和器官。

Answer 1

【答案】 EcoRI和BamHI RNA聚合酶 黏性末端或平末端 農桿菌轉化法 ①和③ 愈傷組織 全能性 基因的選擇性表達

【解析】試題分析：分析題圖，外源DNA分子中含有三種限制酶的切割位點，但限制酶SmaⅠ的切割位點位于目的基因中，因此構建基因表達載體時不能用該酶切割，而應該用限制酶EcoRI和BamHI切割；圖中①表示花藥離體培養(yǎng)形成單倍體幼苗，②表示單倍體幼苗長成外植體，③表示植物組織培養(yǎng)形成單倍體幼苗（棉株2），④表示人工誘導染色體數目加倍形成純合體棉株3，最后還需要進行篩選。

（1）根據以上分析已知，圖中轉基因過程應該選擇EcoRI和BamHI進行切割目的基因和質粒；啟動子是RNA聚合酶識別和結合的位點，從而驅動基因的轉錄過程；目的基因與載體結合主要依靠二者含有共同的末端（黏性末端或平末端）；將目的基因導入植物細胞常用農桿菌轉化法。

（2）由以上分析可知，圖中①和③過程需要進行離體組織培養(yǎng)；植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化兩個階段，其中脫分化階段形成的是愈傷組織；植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性；細胞分化的根本原因是基因的選擇性表達。