Question

【題目】某實驗小組利用小鼠睪丸細胞觀察染色體的數目，具體操作如下：

①預處理：取雄性小鼠注射秋水仙素。

②取小鼠睪丸放入裝有適最的0.3%KCl溶液的小燒杯中剪碎并過濾，再加0.3%的KCl溶液至4mL后，37℃靜止30min進行低滲處理。

③加入2mL甲醇冰醋酸，800—1000r/min下離心8min，棄上清液再固定8min。

④重復該步驟后加1mL固定液，制成細胞懸液固定5min。

⑤取淸潔的低溫預冷載玻片，距l0—15cm高度滴下2—3滴細胞懸液，之后輕輕敲打載玻片，同時從一側輕輕吹氣。

⑥將載玻片干燥后染色20—30min,用髙倍鏡觀察，實驗現象如下圖所示。

請回答下列問題：

（1）采用小鼠睪丸細胞進行實驗是因為該部位細胞的_________（填細胞分裂類型）比較旺盛，而用適量的秋水仙素溶液注入動物腹腔內進行預處理，其主要作用是_________，以使細胞周期同步化，從而積累大最處于分裂前期的細胞。

（2）利用KC1溶液低滲處理可使細胞膨脹，在制片時細胞易破裂從而有利于_________鋪展。但在低滲處理時應注意控制_________等條件，否則會導致細胞提前破裂或膨脹不足而影響觀察。

（3）制片時在載玻片上滴加細胞懸液后吹氣和敲打的目的是_________。在對裝片染色時，還可采用倒置染色法；在玻璃板上滴加Giemsa染液，用2塊廢舊玻片作支架，將載玻片的標本面向下放置到支架上并使標本與Giemsa染液接觸一段時間，該染色法的優點是可防止染液顆粒沉淀而影響觀察，同時還可以避免__________________。

（4）實驗小組觀察發現，少部分細胞中染色體數目比其他同一時期細胞中染色體數目少，造成這一現象的原因最可能是上述實驗操作中的_________導致。

Answer 1

【答案】 有絲分裂和減數分裂 抑制紡錘體的形成 染色體 溫度（或時間） 使細胞均勻分布（分散開） 染液快速揮發 敲打和吹氣（的過程中導致染色體發生丟失）

【解析】試題分析：觀察染色體的數目，應選擇有分裂能力的細胞。據此，以實驗的具體操作步驟為切入點，圍繞“滲透作用、秋水仙素的作用、染色體變異”等相關知識，對各問題情境進行分析解答。

(1) 小鼠睪丸細胞的有絲分裂和減數分裂比較旺盛，因此，欲觀察細胞中的染色體的數目，可選取該部位細胞進行實驗。秋水仙素的作用是能夠抑制紡錘體的形成。

(2) 利用KC1溶液低滲處理可使細胞吸水膨脹，在制片時細胞易破裂從而有利于染色體鋪展。但在低滲處理時應注意控制溫度（或時間）等條件，否則會導致細胞提前破裂或膨脹不足而影響觀察。

(3) 制片時在載玻片上滴加細胞懸液后吹氣和敲打的目的是使細胞均勻分布（分散開）。采用倒置染色法的優點是可防止染液顆粒沉淀而影響觀察，同時還可以避免染液快速揮發。

(4) 少部分細胞中染色體數目比其他同一時期細胞中染色體數目少，其原因最可能是上述實驗操作中的敲打和吹氣的過程中導致染色體發生丟失所致。