Question

【題目】基因工程制藥是制藥行業的一支新軍，不僅具有獨特的優勢，發展速度也很快，下圖是應用基因工程構建皰疹病毒亞單位疫苗的方法，請根據圖示回答下列問題：

（1）提取單純皰疹病毒DNA后用__________酶切取___________基因作為目的基因，獲取目的基因后，要用__________對其進行擴增。

（2）首先，要已知目的基因的_______________，以便人工合成引物。將過量的引物與目的基因混合，加熱到_____℃，使雙鏈DNA解旋成單鏈，之后冷卻到55-60℃，引物與DNA單鏈結合，下一步，加入_________和4種脫氧核苷酸，升高溫度至70-75℃后，完成互補鏈的合成，如此重復循環多次，直到產生足夠供實驗用的目的基因。

（3）提取并剪切牛痘DNA，使其與目的基因連接成重組DNA后，在___________中培養一段時間后，分離出無害的病毒（疫苗），它含有與______________相同的外殼。

（4）將分離出的疫苗注射到人體內，激活人體的______________免疫，產生抗體和記憶細胞。

Answer 1

【答案】 限制酶 外殼蛋白 PCR技術 一段核苷酸序列 90—95 Taq酶 活細胞 單純皰疹病毒 體液

【解析】試題分析：本題考查基因工程、PCR技術等相關知識，解答本題關鍵是能識記基因工程的基本步驟，理解PCR技術的原理，再結合題意，就能準確作答。

（1）據題干信息可知，利用皰疹病毒的蛋白質外殼制成疫苗，所以要獲得控制合成皰疹病毒蛋白質外殼的基因，即為本實驗的目的基因，常利用特定的限制酶進行切割皰疹病毒DNA可以獲取目的基因；如果需要大量的目的基因，則可以通過PCR技術進行擴增。

（2）PCR技術可在體外大量擴增目的基因，該技術的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物，PCR反應中溫度呈現周期性變化，其中加熱到90～95℃使是雙鏈DNA解聚為單鏈，然后冷卻到55-60℃使引物與互補DNA鏈結合，在加入熱穩定性DNA聚合酶和合成DNA的原料，即4種脫氧核苷酸；繼續加熱到70～75℃，目的是在DNA聚合酶作用下進行延伸。

（3）提取并剪切牛痘DNA，使其與目的基因連接成重組DNA，通過顯微注射法將含有牛痘DNA的表達載體導入到牛的活細胞中，經過一段時間培養后，可獲得與皰疹病毒相同的外殼。

（4）疫苗注射到人體內后，機體會產生特異性免疫，在特異性免疫中能產生抗體的只有體液免疫過程。