Question

【題目】回答下列（一）（二）小題

（一）請回答野生酵母的培養和分離及果酒制作實驗的有關問題：

（1）從葡萄多年生長的環境中獲取少量土樣，配制成土壤稀釋液，然后取0．1ml稀釋液加入到____培養基中，用____（工具）進行___分離，最后培養得到野生酵母菌。將分離獲得的菌種進行誘變培養后，根據不同菌株的____特征，分別篩選出高產谷胱甘肽酵母菌（甲）和低產硫化氫的酵母菌（乙）。實驗結束后，使用過的培養基應進行滅菌處理才能倒掉，目的是___________

（2）成熟的紫葡萄，常用____

A．高錳酸鉀 B．次氯酸鈉 C．乙醇 D．無菌水

溶液浸泡約5min，然后制成勻漿放入發酵罐中，并接種相應菌株，發酵獲得高品質的葡萄酒。若向發酵罐中加入一定量的____，可獲得酒精含量和糖含量較高的果酒。

（二）某小組欲進行基因工程菌的構建與研究。請回答下列問題：

（1）獲取上述高產谷胱甘肽酵母菌（甲）的DNA，經____酶處理得到DNA片段后建立____，從中獲取目的基因。

（2）將目的基因與質粒構建成____，將其導入低產硫化氫的酵母菌（乙）后，經培養獲取大量酵母菌，再通過分離純化培養，根據____

A．標記基因的表達 B．目的基因的導入

C．硫化氫的含量 D．谷胱甘肽的含量

檢測篩選出優良酵母菌。以上過程中的分離純化培養相當于動物細胞____培養法。

（3）若要培養轉基因植物，還需要用到_________技術，培養過程中主要是通過____________進行調控。

Answer 1

【答案】 固體 玻璃刮刀 涂布 菌落 防止造成環境污染 A 蔗糖 限制性核酸內切酶 基因文庫 重組質粒 D 克隆 植物組織培養（植物克隆） 平衡的植物激素配比（或植物激素或植物生長調節劑或生長素和細胞分裂素）

【解析】（一）

分析：參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養兼性厭氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧條件下，反應式如下：C6H12O6+6H2O+6O2 6CO2+12H2O+能量；
（2）在無氧條件下，反應式如下：C6H12O6 2CO2+2C2H5OH+能量。

（1）從葡萄多年生長的環境中獲取少量土樣，配制成土壤稀釋液，然后取0．1ml稀釋液加入到固體培養基中，用玻璃刮刀（工具）進行涂布分離，最后培養得到野生酵母菌。將分離獲得的菌種進行誘變培養后，根據不同菌株的菌落特征，分別篩選出不同的細菌。實驗結束后，為防止造成環境污染，使用過的培養基應進行滅菌處理才能倒掉。

（2）成熟的紫葡萄，常用高錳酸鉀溶液浸泡約5min，以達到消毒和去除農藥殘留的目的，然后制成勻漿放入發酵罐中，并接種相應菌株，發酵獲得高品質的葡萄酒。若向發酵罐中加入一定量的蔗糖，可獲得酒精含量和糖含量較高的果酒。

（二）

分析：基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取；（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因導入受體細胞；（4）目的基因的檢測與鑒定。

（1）目的基因經限制酶處理得到DNA片段后建立基因文庫，從中獲取目的基因。

（2）將目的基因與質粒構建成重組質粒。轉入高產谷胱甘肽基因的酵母菌的谷胱甘肽含量高，所以可以根據谷胱甘肽的含量檢測篩選出優良酵母菌。以上過程中的分離純化培養相當于動物細胞克隆培養法。

（3）若要培養轉基因植物，還需要用到植物組織培養技術，培養過程中主要是通過生長素和細胞分裂素進行調控。