Question

【題目】下圖為用32P標記的T2噬菌體侵染大腸桿菌（T2噬菌體專門寄生在大腸桿菌體內）的實驗，據圖回答下列問題：

（1）圖中錐形瓶中的培養液是用來培養___________，其內的營養成份__________（含有，不含有）32P。

（2）對下列可能出現的實驗誤差進行

①測定發現在攪拌后的上清液中含有0.8%的放射性，最可能的原因是培養時間較短，有部分噬菌體__________________________。

②當接種噬菌體后培養時間過長，發現在攪拌后的上清液中也有放射性，最可能的原因是復制增殖后的噬菌體___________________________。

（3）請你設計一個給T2噬菌體標記上32P的實驗步驟：________________________________

Answer 1

【答案】大腸桿菌不含有沒有侵入大腸桿菌從大腸桿菌體內釋放出來在含32P的培養基中培養大腸桿菌，再用上述大腸桿菌培養噬菌體，得到32P標記的噬菌體

【解析】

T2噬菌體侵染細菌的實驗步驟：分別用35S或32P標記噬菌體→噬菌體與大腸桿菌混合培養→噬菌體侵染未被標記的細菌→在攪拌器中攪拌，然后離心，檢測上清液和沉淀物中的放射性物質。

（1）由于該實驗是用32P標記的T2噬菌體侵染大腸桿菌，而錐形瓶中的培養液是用來培養大腸桿菌的，所以其內的營養成分中不能含有32P，以免造成干擾。

（2）32P標記的是噬菌體的DNA，噬菌體在侵染細菌時，DNA進入細菌內，并隨著細菌離心到沉淀物中，所以經過離心過程后，上清液放射性應該為0，但實驗數據與理論數據之間存在誤差，即離心后上清液中有少量放射性，可能的原因有：

①少量的噬箘體沒有侵入大腸桿菌內，經離心后分布在上清液中；

②培養時間過長，復制增殖后的噬菌體從大腸桿菌體內釋放出來，離心后分布在上清液中。

（3）由于噬菌體是病毒，不能在培養基上獨立生存，只有在活細胞中才能進行正常的生命活動。因此要給T2噬菌體標記上32P，需要先用含有32P的培養基培養標記大腸桿菌，再用T2噬菌體去感染被32P標記大腸桿菌，一段時間后在培養液中提取出所需要的T2噬菌體，其體內的DNA被標記上32P。