Question

【題目】【生物——選修1：生物技術實踐】蘋果園廣泛使用的一種除草劑（含氮有機物）在土壤中不易被降解，長期使用可污染土壤。為修復被該除草劑污染的土壤，科學工作者按甲圖程序選育能降解該除草劑的細菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養基不透明）。

（1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理。現有一升土壤浸出液，用無菌吸管吸取1 mL液樣至盛有9 mL無菌水的試管中，再稀釋103倍。各取0．1 mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三個培養基上培養，記錄的菌落數分別為55、56、57，則每升原土壤浸出液樣中菌體數為____________。

（2）科學工作者為修復被該除草劑污染土壤的目的來選擇細菌，所用培養基應該___________。

（3）接種技術的核心是__________。在劃線接種時，連續劃線的目的是將聚集的菌種逐步____________，培養時，只有很少菌落出現，大部分細菌在此培養基上不能生長的主要原因是_____________或有氧條件抑制了這些細菌的生長。

（4）在培養基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是_________，有透明帶菌落利用的氮源主要是_________，據此可篩選出目的菌。實驗結果如乙圖顯示的A～E五種菌株中，_________是最理想菌株。

Answer 1

【答案】（1）5．6×109 （2）在無氮培養基添加了該除草劑

（3）防止雜菌污染，保證培養物的純度 稀釋獲得單個菌落 培養基中缺少這些細菌可利用的氮源

（4）氮氣 該除草劑 E

【解析】（1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理。現有一升土壤浸出液，用無菌吸管吸取1 mL液樣至盛有9 mL無菌水的試管中，再稀釋103倍。各取0．1 mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三個培養基上培養，記錄的菌落數分別為55、56、57，則每升原土壤浸出液樣中菌體數為（55+56+57）/3x103x1000x10x10=5．6×109個。

（2）科學工作者為修復被該除草劑污染土壤的目的來選擇細菌，所用培養基應該在無氮培養基中添加了該除草劑，即選擇除草劑為唯一有機氮源。

（3）接種技術的核心是防止雜菌污染，保證培養物的純度。在劃線接種時，連續劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋以獲得單個菌落；培養時只有很少菌落出現，大部分細菌在此培養基上不能生長的主要原因是培養基中缺少這些細菌可利用的氮源或有氧條件抑制了這些細菌的生長。

（4）在培養基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是氮氣，有透明帶菌落利用的氮源主要是該除草劑，據此可篩選出目的菌。由于理想菌株分解除草劑的能力最強，故在含除草劑的培養基中形成的透明帶最大，所以實驗結果A～E五種菌株中，E是最理想菌株。