Question

【題目】如表所示列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點．下列說法錯誤的是（ ）

A．一個圖1所示的質粒分子經SmaⅠ切割后，含有4個游離的磷酸基團

B．用圖1中的質粒和圖2中的目的基因構建重組質粒，不能使用SmaⅠ切割

C．圖2中為防止酶切后單個含目的基因的DNA片段自身連接成環狀，不能使用EcoRⅠ

D．為了獲取重組質粒，最好用BamHⅠ和HindⅢ同時切割質粒和外DNA

Answer 1

【答案】A

【解析】

試題分析：A、質粒切割前是雙鏈環狀DNA分子，所有磷酸基團參與形成磷酸二酯鍵，故不含游離的磷酸基團．從圖1可以看出，質粒上只含有一個SmaⅠ的切點，因此被該酶切割后，質粒變為線性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個游離的磷酸基團，因此切割后含有兩個游離的磷酸基團，A錯誤；

B、基因表達載體必須具備目的基因、啟動子、終止子、標記基因，圖中質粒的標記基因為抗生素抗性基因，而Sma I的切割位點就在該基因上，因此用質粒和外源DNA構建重組質粒，不能使用Sma I切割，B正確；

C、由于同種限制酶切割形成的黏性末端相同，圖2中為防止酶切后單個含目的基因的DNA片段自身連接成環狀，不能使用EcoRⅠ，C正確；

D、使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA，各自會有不同黏性末端，能防止自身環化，D正確．

故選：A．