Question

【題目】下圖為培育轉基因抗蟲棉的兩種思路，請據圖回答問題：

（1）與思路2相比，思路1的優點是篩選出的目的植株_____________。

（2）構建重組質粒時，需要使用的限制酶是_____________，還需要使用的工具酶是_____________。

（3）圖中過程①獲取的完整的重組質粒，除了圖中標出的特殊DNA片段外，還應該有_____________等部分；過程②常用的方法是_____________；過程③常用的試劑為_____________；培育獲取棉株2 或棉株4采用的生物學技術是_____________。

（4）為檢測棉株3、棉株4的抗蟲特性，常使用的方法是_____________。

Answer 1

【答案】 能穩定遺傳（是純合子） EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ DNA連接酶 標記基因（和復制原點） 農桿菌轉化法 秋水仙素 植物組織培養 接種害蟲，觀察棉株是否有抗蟲能力

【解析】試題分析：思路1是采用單倍體育種方法，結合基因工程，培育出目的植株．比思路2相比，該方法的優點是目的植物是純合子，能穩定遺傳．圖為培育轉基因抗蟲棉的兩種思路，思路1中，其中①表示基因表達載體的構建過程；②表示將目的基因導入受體細胞；③用人工誘導單倍體轉變成正常的植物．

（1）思路1是采用單倍體育種方法，結合基因工程，培育出目的植株，比思路2相比，該方法的優點是目的植物是純合子，能穩定遺傳。
（2）根據圖分析，如果用SmaI酶切割目的基因時，會破壞目的基因，因此用圖中的質粒和目的基因構建重組DNA分子時，不能使用SmaⅠ酶切割．因此只能選用的限制酶是EcoRⅠ和BamHI切割目的基因和運載體，還需要使用的工具酶是DNA連接酶，構建基因表達載體。
（3）過程①是構建基因表達載體，即重組質粒．基因表達載體中除了具有目的基因、啟動子和終止子之外，還需具有標記基因．過程②是將目的基因導入受體細胞中，受體細胞是植物細胞，常用的方法是農桿菌轉化法；棉株2是單倍體幼苗中外植體中細胞經過植物組織培養技術獲取的，是單倍體．過程③常用的試劑為秋水仙素，是植株2細胞中染色體數目增倍，獲取純合體植株3。
（4）為檢測棉株3、棉株4的抗蟲特性，常使用的方法是接種害蟲，觀察棉株是否有抗蟲能力。