Question

【題目】有些細菌可分解原油，從而消除有原油泄露造成的土壤污染。某同學欲從污染的土壤中采用富集培養的方法篩選出高效降解原油的細菌、經過的一般步驟是采集菌樣→富集培養→純種分離→性能測定，實驗過程如圖13所示，請分析回答：

（1）如圖甲、乙是采用純化微生物培養的兩種接種方法接種后培養的效果圖解，請分析接種的具體方法。

圖A所示的接種方法是___________，圖B所示的接種方法是___________。

（2）在篩選過程中，應將___________接種于以___________為唯一碳源的培養基上，從功能上講，該培養培養基屬于______________________培養基。

（3）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理。現有 土壤浸出液，用無菌吸管吸取 液樣至盛有 無菌水的試管中，依次稀釋倍。各取 已稀釋 倍的水樣分別接種到圖 的三個培養基上培養，記錄的菌落數分別為 、 、 ，則每升原土壤浸出樣液中菌體數為_________________。

（4）①→③重復培養的目的是_________________。

（5）為篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍透明帶區域的大小。一般透明帶區域越大說明該菌株降解原油的能力_________________。

（6）配制培養基時各種成分在溶化后分裝前必須進行調整，接種前要進行__________，在整個微生物的分離和培養中，一定要注意在__________條件下進行。

Answer 1

【答案】（1）稀釋涂布平板法 平板劃線法

（2）土壤樣品稀釋液 原油 選擇

（3）5．6x108

（4）增大分解原油微生物的比例

（5）越強

（6）高壓蒸汽滅菌 無菌

【解析】

試題分析：（1）微生物的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法兩種，圖中A表示稀釋涂布平板法，B表示平板劃線法。

（2）對微生物進行選擇培養時，應將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的固體培養基上，從功能上講，該培養基屬于選擇培養基。

（3）每升原土壤浸出液樣中菌體數為=（55+56+57）÷3÷0．1×1000×103=5．6X108個

（4）經過①②③的重復培養，增大了分解對羥基苯甲酸的微生物的比例。

（5）一般情況下，透明帶區域越大說明該菌株的降解對羥基苯甲酸的能力越強。

（6）培養基制作完成后，需要進行高壓蒸汽滅菌法滅菌，在整個微生物的分離和培養中，一定要注意在無菌條件下進行。