Question

【題目】肺細胞中的let-7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發肺癌。研究人員在體外利用基因工程技術將let-7基因導入肺癌細胞實現表達，發現肺癌細胞的增殖受到抑制，其影響機理如圖，請回答下列問題：

（1）利用基因工程技術抑制肺癌細胞的增殖過程中，還需使用 技術。

（2）獲取let-7基因后欲進行基因擴增應采用 技術，其依據的原理是 。

（3）基因表達載體構建過程中需使用的工具有 。將基因表達載體導入肺癌細胞的常用方法是 。

（4）根據圖示分析，可從細胞中提取 進行分子雜交，以直接檢測let-7基因是否轉錄。肺癌細胞增殖受到抑制，可能是由于細胞中 （RASmRNA/RAS蛋白）含量減少引起的。

Answer 1

【答案】（1）動物細胞培養

（2）PCR DNA雙鏈復制

（3）限制性核酸內切酶（或限制酶）、DNA連接酶、運載體 顯微注射法

（4）RNA（或mRNA） RAS蛋白

【解析】

試題分析：（1）利用基因工程技術將let-7基因導入肺癌細胞前，需使用動物細胞培養技術以培養癌細胞。

（2）獲取let-7基因后欲進行基因擴增應采用PCR技術，其依據的原理是：DNA雙鏈復制的原理。

（3）基因表達載體構建過程中需使用的工具有限制性核酸內切酶（或限制酶）、DNA連接酶、運載體。將基因表達載體導入動物（肺癌）細胞的常用方法是顯微注射法。

（4）判斷目的基因是（let-7基因）否在受體細胞中轉錄，可用分子雜交技術來進行檢測，從細胞中提取RNA（或mRNA）和用放射性同位素或者熒光標記的目的基因單鏈DNA片段進行雜交。根據題中信息“肺組織細胞中的let7基因表達減弱，癌基因RAS表達就增強，引發肺癌”，導入let7基因后，肺癌細胞受到抑制，說明RAS基因表達減弱，導致細胞中的RAS蛋白含量減少，進而導致癌細胞受抑制。