Question

【題目】【生物——選修1：生物技術(shù)實(shí)踐專題】蛋白酶在生物醫(yī)藥和日用化工等生產(chǎn)領(lǐng)域具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。某同學(xué)為篩選產(chǎn)蛋白酶的高產(chǎn)菌株，做了如下實(shí)驗(yàn)步驟（配置了下列培養(yǎng)基，在適宜條件下培養(yǎng)）：

步驟	取樣	培養(yǎng)基	培養(yǎng)結(jié)果
I	土壤樣品	葡萄糖，（NH4）2SO4，K2HPO4·3H2O，KH2PO4,NaCl，CaCl2, MgSO4·7H2O，加水定容	培養(yǎng)液a
II	1mL培養(yǎng)液a	同上	菌落
III	挑取單菌落	細(xì)菌培養(yǎng)基	培養(yǎng)液b

（1）為實(shí)現(xiàn)篩選目的，步驟I所使用的培養(yǎng)基配方中，應(yīng)去除_____________并加入高濃度的_____________。

（2）為實(shí)現(xiàn)目的菌的分離和計(jì)數(shù)，步驟II所使用的培養(yǎng)基中還應(yīng)加入_____________制成平板，采用的接種方法是_____________，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖A。

（3）步驟III應(yīng)挑取圖A中_____________處的菌落，本步驟的目的是____________________。

（4）圖B是該蛋白酶和其它酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即酶在不同溫度下保溫足夠長的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測(cè)其酶活性。在該蛋白酶的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，通常需對(duì)發(fā)酵液在60—70℃保溫一定時(shí)間的，其作用是_________________。

Answer 1

【答案】葡萄糖蛋白質(zhì)瓊脂稀釋涂布平板法a快速增加目的菌的種群數(shù)量（擴(kuò)大培養(yǎng)）大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性

【解析】本題考查微生物的選擇培養(yǎng)及酶活性的檢測(cè)，意在考查考生理解相關(guān)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；具備探究簡(jiǎn)單生物學(xué)問題的能力，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理的能力。

（1）培養(yǎng)基中添加特定的成分以促進(jìn)需要的微生物生長而抑制其它微生物生長，用于進(jìn)行微生物篩選；根據(jù)題意，為篩選產(chǎn)蛋白酶的高產(chǎn)菌株，步驟I所使用的培養(yǎng)基配方中，應(yīng)去除葡萄糖并加入高濃度的蛋白質(zhì)。

（2）為實(shí)現(xiàn)目的菌的分離和計(jì)數(shù)，步驟II所使用的培養(yǎng)基中還應(yīng)加入瓊脂（凝固劑）制成平板，采用的接種方法是稀釋涂布平板法。

（3）圖A中a處的菌落透明圈最大，故其菌種分解蛋白質(zhì)的能力最強(qiáng)，所以步驟III應(yīng)挑取圖A中a處的菌落，本步驟的目的是快速增加目的菌的種群數(shù)量（即擴(kuò)大培養(yǎng)）。

（4）圖B曲線表明，60—70℃條件下，蛋白酶的活性很高而此時(shí)其它酶的活性很低，因此在該蛋白酶的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，通常需對(duì)發(fā)酵液在60—70℃保溫一定時(shí)間的，可大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性。