Question

【題目】[生物一選修1:生物技術實踐]

長期使用除草劑會污染環境，研究發現一除草劑（有機物）能被土壤中某細菌（M）降解。下圖為分離能降解該除草劑的M菌種的過程。請回答下列相關問題：

（1）在液體培養基的基礎上制備固體培養基時常用的凝固劑是_______________。

（2）土壤有“微生物的天然培養基”之稱。為了獲取能降解該除草劑的M菌種，選擇的土壤樣品應來自

__________。圖中①過程所用的培養基中需要加入____________________作為唯一碳源。進行選擇培養的目的是____________________。

（3）圖中②過程劃線所用的工具為__________，該工具在使用前后都要進行__________滅菌。

（4）若要檢測土樣中的細菌含量，應采用__________法進行接種。先將1mL土壤溶液稀釋100倍，然后隨機選取4個經滅菌處理的平板，其中3個平板上分別涂布0.1mL稀釋液，1個平板未涂布稀釋液，適當培養后，4個平板上的菌落數分別為39、38、37和0，則可計算得出每升土壤溶液中的活菌數為__________個。

Answer 1

【答案】 瓊脂 該除草劑嚴重污染的土壤 該除草劑 增加目的菌的濃度 接種環 灼燒 稀釋涂布平板 3.8×107

【解析】本題考查微生物接種與選擇培養、微生物計數等知識，要求考生掌握無菌技術，掌握微生物接種、培養基制備等方法，能利用選擇培養基進行微生物選擇培養和計數，此題難度不大。

（1）在液態培養基的基礎上制備固體培養基時常用的凝固劑是瓊脂。

（2）土壤有“微生物的天然培養基”之稱，根據題意，為了獲取能降解該除草劑的M菌種，選擇的土壤樣品應來自被該除草劑嚴重污染的土壤。圖中①過程是選擇培養，目的是增加目的菌（即能降解該除草劑的M菌種）的濃度，故所用的選擇培養基中需要加入該除草劑作為唯一碳源，以促進目的菌種的生長繁殖，抑制其它微生物生長繁殖。

（3）圖中②過程所用的方法是平板劃線法，劃線所用的工具為接種環，接種環在使用前后都要進行灼燒滅菌，以避免雜菌污染。

（4）若要檢測土樣中的細菌含量，應采用稀釋涂布平板法進行接種；即先將1mL土壤溶液稀釋100倍，然后隨機選取4個經滅菌處理的平板，其中3個平板上分別涂布0.1mL稀釋液，1個平板未涂布稀釋液，適當培養后，4個平板上的菌落數分別為39、38、37和0，即對照組的菌落數為0，說明平板滅菌徹底，則根據三個實驗組的數據可計算得出每升土壤溶液中的活菌數為（39+38+37）3x1000x100= 3.8×107個。