Question

【題目】乙醇等"綠色能源"的開發(fā)備受世界關(guān)注。利用玉米秸稈生產(chǎn)燃料酒精的大致流程為：

（1）玉米秸稈預(yù)處理后，因該選用____酶和____酶形成纖維二糖，再使用___________酶使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄糖。

（2）從以下哪些微生物中可以提取上述酶？________（多選）

A．釀制果醋的醋酸菌B．生長在腐木上的霉菌C．制作酸奶的乳酸菌D．反芻動(dòng)物瘤胃中生存的某些微生物

（3）若從土壤中分離產(chǎn)生這種酶的微生物，所需要的培養(yǎng)基為______（按功能分），培養(yǎng)基中的碳源為__________。微生物在純化培養(yǎng)時(shí)常用方法是________和_________。

（4）在生產(chǎn)糖液的過程中，為了使酶能夠反復(fù)利用，可采用___________技術(shù)。

（5）為測定培養(yǎng)液中某細(xì)菌數(shù)量，某小組同學(xué)抽取1mL培養(yǎng)液經(jīng)10倍的梯度稀釋后進(jìn)行接種培養(yǎng)，每個(gè)培養(yǎng)基上接種量為0.1mL，隨后對每個(gè)培養(yǎng)基中出現(xiàn)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)（結(jié)果如下）。培養(yǎng)液中菌體數(shù)目約為__________________個(gè)/mL

稀釋次數(shù)	4			5			6
培養(yǎng)基編號	1	2	3	1	2	3	1	2	3
菌落數(shù)目	263	321	345	38	4	40	6	2	8

Answer 1

【答案】C1CX葡萄糖苷酶B D選擇培養(yǎng)基纖維素平板劃線法稀釋涂布平板法固定化酶（固定化細(xì)胞）3.9×107

【解析】

1、用植物秸稈生產(chǎn)酒精是利用微生物進(jìn)行發(fā)酵的過程。植物秸稈中的有機(jī)物主要是纖維素，纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶能將其水解成葡萄糖。從土壤中分離纖維素分解菌的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。篩選纖維素分解菌必須使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，并且需要做產(chǎn)纖維素酶發(fā)酵葡萄糖的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行酶活性的檢測。2、常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線分離法的過程是：由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

（1）玉米秸稈預(yù)處理后，因該選用C1酶和CX酶形成纖維二糖，再使用葡萄糖苷酶使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄糖。

（2）由于纖維素分解酶存在于分解纖維素的微生物中，故應(yīng)從富含纖維素的環(huán)境中去尋找纖維素分解菌，則應(yīng)從生長在腐木上的霉菌和反芻動(dòng)物瘤胃中生存的某些微生物中提取。故選：BD。

（3）若從土壤中分離產(chǎn)生這種酶的微生物，所需要的培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的碳源為纖維素。微生物在純化培養(yǎng)時(shí)常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（4）在生產(chǎn)糖液的過程中，為了使酶能夠反復(fù)利用，可采用固定化酶（固定化細(xì)胞）技術(shù)。

（5）統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，應(yīng)該統(tǒng)計(jì)平板中菌落數(shù)目在30—300的，而第4次稀釋后統(tǒng)計(jì)到的數(shù)目只有一個(gè)平板小于大于30小于300，第6次稀釋后各平板統(tǒng)計(jì)的數(shù)目均小于30，這兩次稀釋后統(tǒng)計(jì)的數(shù)目誤差較大，統(tǒng)計(jì)時(shí)應(yīng)除去這兩組數(shù)據(jù)。第5次稀釋后統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目有一個(gè)平板小于30，因此第5次稀釋后兩個(gè)平板上菌落的平均值為（38+40）/2=39個(gè)，因此培養(yǎng)液中菌體數(shù)目約為39/0.1×105=3.9×107個(gè)。